火把花根对油酸肺损伤肺紧密连接蛋白claudin和zo-1表达的调节及其机制研究

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1、分类号：R5单位代码：10752密级：公开学号：20120180宁夏医科大学硕士研究生学位论文火把花根对油酸肺损伤肺紧密连接蛋白Claudin和ZO-1表达的调节及其机制研究TheExperimentalStudryonColquhouniaRootAdjustingExpressionofClaudinandZO-1inLungTightJunctionProteinonRatWithAcuteLungInjurybyoleicacid学位申请人：邵萍指导教师：马希刚申请学位门类级别：医学专业名称：

2、急诊医学研究方向：急性肺损伤所在学院：临床医学院论文完成日期：二〇一五年三月宁夏医科大学研究生院NingxiaMedicalUniversityThesisforApplicationofMaster’sDegreeTheExperimentalStudryonColquhouniaRootAdjustingExpressionofClaudinandZO-1inLungTightJunctionProteinonRatWithAcuteLungInjurybyoleicacidStudent’sNa

3、me:ShaoPingSupervisor：MaXiGangSubjectCategory:MedicalScienceMajor:EmergencyMedicineSpecialty:AcutelunginjuryCollege:ClinicalCollegeCompletionDate:Mar.2015宁夏医科大学学位论文独创性声明＇．、，＞：本人郑重声明：所呈交的学位论文，是个人在皆师的指甘＞独进行硏究工作所取得的成果，无抄袭及编造行为。除义中己经将别加Ｗ注明＇引用的内容外，本论文不

4、含任何其他个人或集体己经发表或撰与过的作品。成果对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在义中确义乂标明并致谢。。本人完全意识到本声明的法律结果山本人承担论文作者签名论义导师签争＾。年。日／１年《７］／日（广月／＞／：＾宁夏医科大学关于学位论文使用授权的声明宁夏医科大学有权保留使用本人学位论文，同意学校按规定向凹家巧关部口机构送交论文的复印件和ＩＵ子版。，允许被巧阅和化阅本人授仪宁ｉ夏医科大学可Ｕ？将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据昨进行检ｎ。索，可Ｗ采用

5、影印、缩印或巧他复印于段保存和汇编本巧位论文ｌＷ公布（包括刊登）论文的全部或部分内容。（保密论文在解密后应遵守此规定）论义作者籍名论义导师签木。脾ｒ月，。曰ｒ年仍仰心户／火把花根对油酸肺损伤肺紧密连接蛋白Claudin和ZO-1表达的调节及其机制研究摘要目的通过观察紧密连接蛋白Claudin-2、Claudin-5及ZO-1在油酸致急性肺损伤(acutelunginjury，ALI)大鼠肺组织中表达的变化及火把花根对其调节作用，探讨火把花根对油酸型ALI大鼠肺组织紧密连接蛋白Cl

6、audin和ZO-1表达的调节及其机制，为火把花根在临床治疗ALI提供理论和实验依据。方法1.70只雄性Sprague-Dawley大鼠，随机分为正常对照组（C组，n=10）、ALI组（A-1-1组，n=15）和火把花根[H1、H2、H3(500、600和700mg·kg·d)，n=15·group]给药组。给药周期10天。2.A组生理盐水2ml连续灌胃10天，第10天，灌胃1h后，尾静脉注射油酸-1（0.04mL·kg）建立大鼠ALI模型；H组火把花根片研磨后溶于生理盐水中，连续灌胃10天，分每天2

7、次，第10天灌胃后1h，和模型组一样注射同等剂量油酸；C组生理盐-1水2ml连续灌胃10天，第10天，灌胃1h后，尾静脉注射生理盐水（0.04mL·kg）。3.尾静脉注射后6h麻醉大鼠，腹主动脉采血、支气管肺泡灌洗液（BALF），BCA法测定肺通透指数（LPI）；取肺组织，测定湿/干质量比（W/D）。3.取肺组织固定包埋，苏木素-伊红（HE）染色法光镜下观察肺组织形态学变化，进行肺损伤评分（LIS）；电镜下观察肺组织超微病理学改变。4.用免疫组织化学法测定大鼠肺组织Claudin-2、Claudin-

8、5及ZO-1的定位和表达。5.用WesternBlot法检测大鼠肺组织Claudin-2、Claudin-5及ZO-1蛋白的表达量。I结果1.各组大鼠肺组织病理形态学改变大体观察：C组肺组织未见明显异常；A组肺组织肿胀，表面广布出血点；H组肺组织轻度肿胀，H2组减轻更明显。光镜下观察：C组肺泡上皮组织结构完整，肺泡腔清晰，壁光滑，肺泡腔内无渗液；A组肺泡壁欠完整，肺泡萎陷、肺间隔增宽、间质水肿、弥漫性出血，肺泡腔内可见大量炎性细胞浸润，红细胞渗出伴血浆蛋