早期断奶对仔猪肠通透性和肠上皮紧密连接蛋白 occludin mrna表达的影响

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1、动物营养学报２００８，２０（４）：４４２４４６犆犺犻狀犲狊犲犑狅狌狉狀犪犾狅犳犃狀犻犿犪犾犖狌狋狉犻狋犻狅狀早期断奶对仔猪肠通透性和肠上皮紧密连接蛋白犗犮犮犾狌犱犻狀犿犚犖犃表达的影响刘海萍胡彩虹徐勇（浙江大学动物科学学院，浙江大学动物分子营养学教育部重点实验室，杭州３１００２９）摘要：本文旨在研究早期断奶仔猪的肠通透性变化并探讨其机制。试验采用３２头２１日龄断奶仔猪，并于仔猪２１、２８和３５日龄取样测定血浆犇乳酸含量、二胺氧化酶（犇犃犗）活性和尿中乳果糖／甘露醇比率观察肠通透性改变，同时检测肠上皮紧密连接蛋白犗犮犮犾狌犱犻狀犿犚犖犃表达水平。结果显示

2、：与断奶前相比，２８日龄时血浆犇乳酸含量、犇犃犗活性和乳果糖／甘露醇比差异达到显著水平（犘＜０．０５），且至３５日龄时，肠道仍然维持这种较高的通透性；仔猪断奶后犗犮犮犾狌犱犻狀犿犚犖犃相对表达量下降明显，与断奶前相比差异显著（犘＜０．０５），３５日龄时，表达量有所恢复，但仍然低于断奶前表达水平。试验结果提示，早期断奶后仔猪肠道的通透性增加，肠屏障功能破坏，可能归因于肠上皮细胞紧密连接蛋白犗犮犮犾狌犱犻狀犿犚犖犃表达下降。关键词：早期断奶；仔猪；肠通透性；紧密连接；犗犮犮犾狌犱犻狀随着养猪生产向集约化和规模化方向发展，为胞间紧密连接蛋白犗犮犮犾狌犱犻狀犿犚犖

3、犃的表达来探讨提高母猪的繁殖利用率，在生产中普遍采用早期断相关机制。奶技术。通过将常规断奶时间从３５～４２犱提早到２８犱或更早，可使母猪的年产胎数和猪场的生产效１材料与方法率提高５％～１０％。但是，仔猪断奶后受心理、环１．１材料境、营养应激等因素的影响，易造成仔猪断奶后消犜狉犻狕狅犾、反转录酶、犜犪狇犇犖犃聚合酶、犱犖犜犘和化、吸收和免疫机能的损伤，进而引起食欲下降、消割胶回收试剂盒均购自上海生工。狆犌犈犕犜犈犪狊狔化不良、腹泻、生长受阻等所谓“仔猪早期断奶综合犞犲犮狋狅狉试剂盒和质粒抽提试剂盒等均购自犘狉狅［１３］症”，给养猪业带来巨大经济损失。犿犲

4、犵犪公司。受体菌为大肠杆菌狋狅狆１０，由浙江大学已有较多研究报道早期断奶会引起仔猪肠形态动物分子营养学教育部重点实验室提供。发生变化，绒毛高度下降，隐窝深度加深，肠绒毛上１．２试验动物与试验设计成熟细胞数量减少，从而造成仔猪肠道消化吸收面试验选取体况相似、胎次和预产期接近的同品［４７］积减少，消化能力下降。然而关于早期断奶引起种母猪６窝，母猪均为第３胎，产仔数为９～１１头，仔猪肠屏障通透性变化的报道却较少，犗犮犮犾狌犱犻狀是哺乳期内为保证各窝仔猪生长，同窝内仔猪调整乳一种跨膜蛋白，４个跨膜结构将犗犮犮犾狌犱犻狀分为２个头以保证充分利用母猪泌乳力。生产后仔猪

5、哺乳至细胞外环和２个细胞内环，犗犮犮犾狌犱犻狀主要集中于紧２１日龄断奶，仔猪均为杜长大三元杂交品种。断奶密连接纤维内，有一小部分犗犮犮犾狌犱犻狀沿着细胞侧膜时间为断奶当日晚２０：００～２１：００。断奶时，赶走母分布而不进入纤维内，其功能维持关系到紧密连接猪，仔猪仍留在原处，试验仔猪７日龄开始诱食，断的完整性。哺乳动物细胞间紧密连接位于细胞侧壁奶后按照体重相近、公母各占１／２的方法选取３２头的顶部，分隔细胞顶面与基侧面，防止上皮细胞间隙断奶仔猪，平均体重为（５９±０３）犽犵，饲喂基础日中的物质溢出和大分子在细胞间隔中穿行，当前对粮至３５日龄，仔猪自由采食和

6、饮水。［８９］其研究主要集中在医学方面。本文研究了早期１．３试验日粮断奶对仔猪肠通透性影响，同时通过检测肠上皮细基础日粮参照美国犖犚犆（１９９８版）断奶仔猪的收稿日期：２００８０２２０基金项目：浙江省自然科学基金项目（犢３０６０２８），浙江省教育厅重点项目（２００６１３２２）作者简介：刘海萍（１９８２），女，山西吕梁人，硕士研究生，主要从事动物分子营养学研究。犈犿犪犻犾：犺犪犻狆犻狀犵犾犻狌１００２＠１６３．犮狅犿通讯作者：胡彩虹，博士，副研究员，犈犿犪犻犾：犮犺犺狌＠狕犼狌．犲犱狌．犮狀４期刘海萍等：早期断奶对仔猪肠通透性和肠上皮紧密连接蛋白

7、犗犮犮犾狌犱犻狀犿犚犖犃表达的影响４４３营养需要配合成颗粒饲料。配方及主要营养水平见３０００狉／犿犻狀离心后制备血浆，－７０℃保存。血浆［１０］表１。犇乳酸浓度测定参照犅狉犪狀犱狋等建立的分光光度法。血浆二胺氧化酶（犇犃犗）活性测定参照黎君友［１１］表１基础日粮配方及营养水平（风干基础）等建立的分光光度法。犜犪犫犾犲１犐狀犵狉犲犱犻犲狀狋狊犪狀犱狀狌狋狉犻犲狀狋犾犲狏犲犾狊狅犳犫犪狊犪犾犱犻犲狋随机选取未屠宰仔猪４头，经胃管喂服双糖溶（犪犻狉犱狉狔犫犪狊犻狊，％）液，每头灌服１０犿犔检测溶液（含１０％乳果糖和项目犐狋犲犿狊含量犆狅狀狋犲狀狋５％甘露醇）。

8、随后连续收集６犺尿液，将各组收集组成犐狀犵狉犲犱犻犲