黄龙汤对脓毒症大鼠肠黏膜上皮Claudin-1和Occludin的mRNA及蛋白表达水平的影响.pdf

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1、·l38·中国中西医结合急救杂志2015年3月第22卷第2期ChinJTCMWMCritCare，March2015，Vo122，No‘2．·论著·黄龙汤对脓毒症大鼠肠黏膜上皮Claudin一1和Occludin的mRNA及蛋白表达水平的影响付瑜姜树民黄煜(1．辽宁中医药大学，辽宁沈阳110032；2．辽宁中医药大学附属医院，辽宁沈阳110032)【摘要】目的探讨黄龙汤对脓毒症大鼠肠黏膜上皮紧密连接蛋白Claudin一1和Occludin的mRNA及蛋白表达水平的影响。方法将55只Wistar大鼠按随机数字表法分为假手术组(n-m-10)、模型组(n=15)、西药治疗组(n=15)和中西药联

2、合组(n=15o采用盲肠结扎穿孔术(cIJP)复制脓毒症模型，假手术组只手术不行CLP。假手术组和模型组灌胃2mL生理盐水，西药治疗组腹腔注射美罗培南每次50mg；中西药联合组在西药治疗基础上灌胃中药黄龙汤[生大黄(后下)15g，芒硝10g，枳实15g，厚朴10g，人参10g，当归20g，黄芩15g，甘草10g煎浓成150mL]每次2mL(含生药0．68g／mL)，4组均每日2次。给药4d后处死大鼠，取临近回盲部的部分回肠组织约10cm，用反转录一聚合酶链反应(RT—PCR)检测肠组织Claudin一1和Occludin的mRNA表达水平，用蛋白质免疫印迹试验(WesternBlot)检测C

3、laudin—l和Occludin的蛋白表达水平。结果与假手术组比较，模型组、西药治疗组及中西药联合组大鼠小肠上皮Claudin一1和Occludin的mRNA[积分吸光度()比值]及蛋白表达水平(灰度值比值)均明显下降(Claudin一1mRNA：0．327±0．029、0．387±0．035、0．420±0．053比0．561±0．035，OccludintuRNA：0．364±0．058、0．422±0．033、0．442±0．048比0．616±0．036，Claudin一1篮白：0．307±0．015、0．337±0．017、0．355±0．027比0．426±0．017，Occl

4、udin蛋白：0．326±0．028、0．355±0．O17、0．366±0．025比0．455±0．018，P

5、teinexpressionlevelsofintestinalmucosalepithelialClaudin-IandOccludininsepsisrat凡，JiangShumin，HuangYu．LiaoningUniversityofTraditionalChineseMedicine，Shenyang110032，Liaoning，ChinaCorrespondingauthor：JiangShumin,AfiliatedHospitalofLiaoningUniversityofTraditionalChineseMedicine，Shenyang110032，Liaoning

6、,China，Emaihshuminj@163．corn[Abstract]ObjectiveToinvestigatetheefectsofHuanglongdecoctiononmRNAandproteinexpressionlevelsofintestinalepithelialtightjunctionproteinClandin一1andOccludininratwithsepsis．MethodsFifty-fiveWistarratswererandomlydividedintoshamoperationgroup(n=lO)，modelgroup(n=15)，westernm

7、edicinetreatmentgroup(15rats)andcombinedtraditionalChineseandwesternmedicinegroup(n=15)．Insepsismodelgroup，cecalligationwithpuncture(CLP)wasreproduced．Intheshamoperationgroup，thestepsofoperationperformedwer