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1、松根液对发酵茯苓菌丝产量和多糖成分的影响的论文【摘要】目的观察松根液对发酵茯苓菌丝产量和多糖含量的影响及发酵茯苓菌丝与天然茯苓多糖含量的差别。方法加松根液与不加松根液发酵培养茯苓菌丝,将两者在菌丝产量、水溶性多糖含量方面进行比较;并将发酵菌丝与天然茯苓进行水溶性多糖含量比较。结果加松根液发酵培养的茯苓菌丝产量有提高,但水溶性多糖含量下降;发酵菌丝较天然茯苓水溶性多糖含量显著提高。结论松根液对发酵茯苓菌丝产量和多糖含量的影响不同;发酵茯苓菌丝多糖含量高于天然茯苓。【关键词】松根液;发酵;茯苓菌丝;茯苓多糖effectsof
2、pinerootsolutiononproductionandpolysaccharidesoffermentationporiamyceliaacycollege,hunanuniversityoftcm,changsha410208,china) abstract：objectivetostudytheeffectofpinerootliquidonthefermentationporiamyceliayieldandcontentofentationporiamyceliumandthenaturalporia.
3、methodsporiamyceliaentedliquid,theproductionofentationmyceliaandnaturalporiaentationporiamyceliaculturedyceliaentationporiamyceliayieldandpolysaccharidecontent.entationmyceliaentation;poriamycelia;pachymaran 茯苓(poriacocosin后备用。试剂均为国产分析纯。 1.2主要仪器 hzq-f160全温震荡培养
4、箱(江苏太仓市华美生化仪器厂),uv-9200紫外-可见光分光光度计(北京瑞利分析仪器公司),电子天平(上海康平仪器仪表有限公司),恒温干燥箱(宁波江南仪器厂),cl-20m高速冷冻离心机(赛特湘仪离心机仪器有限公司)。 1.3液体发酵培养基 葡萄糖30g,酵母浸膏3.9g,蛋白胨5.1g,k2hpo41g,mgso4·7h2o0.5g,水1l[1-2]。 2方法与结果 2.1发酵茯苓菌丝的制备 试验分为发酵茯苓菌丝对照组(对照组)、0.5%松根液发酵茯苓菌丝组(0.5%松根液组)、1%松根液发酵茯苓菌丝组(1
5、%松根液组)、2%松根液发酵茯苓菌丝组(2%松根液组)。取250ml干净锥形瓶,分别加入60ml液体发酵培养基,其中松根液组分别加入0.3、0.6、1.2ml100%的松根液,使其成为含松根液相对应浓度的发酵培养基。放入高压蒸汽锅中121℃灭菌20min。自然冷却后于接种操作台中接种茯苓菌种,接种完毕后将培养瓶置于全温震荡培养箱中培养。培养条件：避光,温度25.6℃,转速150r/min。培养144h后,取出,离心,收集菌丝,58℃恒温干燥后称重。对照组及0.5%、1%、2%松根液组菌丝干重分别为13.990、14.11
6、0、14.325、14.340g/l。 2.2茯苓菌丝多糖测定 2.2.1茯苓多糖制备精密称取各组发酵茯苓菌丝干燥样品各2.5g及天然茯苓块(茯苓块组)、天然茯神块(茯神块组)样品各7.5g(因天然茯苓和茯神2.5g时多糖成分太少,故将用量增加到7.5g),分别精密加入20倍样品量的蒸馏水,精密称重。煎煮1h,放冷至室温,补充加入蒸馏水至原来重量。离心后,取上清液。各发酵茯苓菌丝组取30ml上清液,浓缩至5ml,茯苓块、茯神块组取上清液90ml浓缩至15ml。分别加入3倍量无水乙醇,静置3h后,离心,取沉淀。分别用无
7、水乙醇洗涤2次,干燥后称重[3-4]。见表1。表1茯苓多糖沉淀率 2.2.2葡萄糖标准曲线精密称取10mg葡萄糖,溶解于100ml容量瓶中,分别吸取0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.9ml,分别加入0.7ml5%苯酚,迅速加入3.0ml浓硫酸,蒸馏水定容至5ml,振摇5min,于494nm处测定吸光度。以葡萄糖浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标,得回归方程：y=12.779x-0.0211,r2=0.9923。见表2。表2葡萄糖标准曲线 2.2.3供试品溶液的制备取“2.2.1”项各组茯苓多糖沉淀物,用蒸馏水溶
8、解后,定容至5ml,离心后取上清液0.05ml,再用蒸馏水定容至5ml,得供试品溶液。 2.2.4供试品多糖的测定精密吸取上述供试品溶液0.2ml,分别加入0.7ml5%苯酚,迅速加入3.0ml浓硫酸,蒸馏水定容至5ml,振摇5min,于uv-9200紫外-可见光分光光度计494nm处测定吸光度,并代入回归方程。结
