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《毕业设计(论文)-人参蛋白及多肽提取工艺及活性研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、长春工业大学人文信息学院学士学位论文摘要目的:人参蛋白及多肽主要具有抗脂质分解、抗血红细胞聚积、抗真菌、抗病毒、精氨酸酶活性等。选择研究较少但活性多样的大分子-人参蛋白及多肽,通过现代分离纯化技术、活性检测技术及分析鉴定技术进行生物特性研究。通过对不同参之间的蛋白成分进行比较和研究,对人参的一些多肽成分的分析和应用提供依据。方法:采用中药化学及生物化学提取法,结合离子交换、凝胶过滤层析和反相C18层析等现代生物分离技术,利用膜分离技术及柱层析技术对总蛋白进行分离纯化,结合细胞活性实验进行活性筛选,对人参中的蛋白及多肽进行了分离纯化,采用HPLC、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(
2、SDS-PAGE)及凝胶电泳图像分析软件等谱学技术,初步研究了这些蛋白多肤的结构,并从细胞水平进行了体外活性实验,探讨蛋白与多肤的生物活性。结果:采用现代生物层析分离技术从人参中分离纯化得到3个蛋白质单体化合物,分别为GSPⅠ、GSPⅡ及GSPⅢ。经基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱人参蛋白及多肽药理活性实验表明,人参蛋白GSPll对金黄色葡萄球菌具有抑制作用;对Hep-2细胞具有抑制作用,对3T3细胞具有增殖作用,且活性呈现一定量效关系。关键词人参多肽提取工艺活性研究23长春工业大学人文信息学院学士学位论文ABSTRACTObjective:Ginsengproteinsan
3、dpolypeptide,whichhaveavarietyofbiologicalactivitiesbutlessreasearches,werestudiedbymoderntechnologiesincludingisolationandpurificationtechnology,activitydetectiontechnologyandanalysis-identificationtechnology.Providingabasisforidentificationandqualityevaluationamongginseng,wildginsengandAm
4、ericanginsengbyshowingacomparativestudyoftheirwater-solubleproteincomponents.Methods:Usingdifferentbuffer,differentratioofsolution,differentextractiontimetoextracttheginsengprotein,usingBradfordmethod,determintherateofproteinextractionfortheevaluationStandards,choosethebestoptimizedextracti
5、onprocess.Purificationwascarriedbyhollowfibersystemandcolumnchromatographytechnology,combinedwithcellactivitytoscreeningactivitycomponent.Comparethedifferenceoftheproteinsamongginseng,wildginsengandAmericanginsengbyusingSDS-polyacrylamidegelelectrophoresis(SDS-PAGE)andimageanalysissoftware.
6、Results:ThreeproteinswereobtainedfromGinseng:GSPⅠ、GSPⅡandGSPⅢ。activityexperimentsshowthatithaveinhibitoryeffecton3T3cellsproliferationandhaveinhibitoryeffectonHep-2cellsproliferation,KeywordsGinsengPolypeptideExtractionProcessPropert23长春工业大学人文信息学院学士学位论文目录第一章文献综述11.1人参的发展趋势及待解决问题11.2人参蛋白的研究现
7、状21.3蛋白质及多肽在中药鉴别中的重要地位41.4本课题研究的内容及意义4第二章 材料与仪器62.1材料与试剂62.1.1原料62.1.2其它材料与试剂62.2仪器7第三章 实验方法83.1人参多肽的分离纯化83.1.1人参多肽的提取制备83.1.2人参多肽的纯化83.1.3高效凝胶过滤色谱(HPGFC)检测83.1.4基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)检测83.2人参多肽的活性研究93.2.1细胞系93.2.2试剂配制93.2.3传代细胞培养103.2.4样品配制103.2