抗肿瘤活性青蛤多肽的提取工艺研究.pdf

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1、安徽农业科学,JournalofAnhuiAgr1.Sci.2014,42(12):3576—3577,3579责任编辑陈玉敏责任校对李岩抗肿瘤活性青蛤多肽的提取工艺研究闫海强,滕芳芳,刘志新,黄芳芳,杨最素,丁国芳(浙江海洋学院,浙江省海洋生物医用制品工程技术研究中心,浙江舟山316022)摘要【目的]探究具有抗肿瘤活性的青蛤多肽的最佳提取工艺路线。[方法]选择胰蛋白酶酶解青蛤,以酶解液对PC-3细胞增殖抑制率(IR)为指标,研究料液比、温度、pH、加酶量和酶解时间对多肽提取率的影响,探讨最佳工艺,并采用超滤及G25洗脱分离纯化提取液

2、。『结果]当温度为45oC、pH为7.0、料液比为1:3、酶解时间为6h、加酶量为300U/g时,分子量为3~5kD青蛤提取液的抗肿瘤活性最好;分离纯化后在280nm波长处得到3个峰,其中峰1和峰2成分抗肿瘤活性显著。[结论]以细胞增殖抑制率为指标可以确定青蛤多肽的提取及优化工艺路线。关键词青蛤多肽;细胞增殖抑制率;分离纯化中图分类号S966文献标识码A文章编号0517—6611(2014)12—03576—02AnticancerActivityofPeptidesIsolatedfromHydrolySatesofcylcinasi

3、nensisYANHai-qiang,DINGGuo—fangetal(SchoolofFoodScienceandMedicalofZhejiangOceanUniversity,ZhejiangProvincialEngineer—ingTechnologyResearchCenterofMarineBiomedicalProducts,Zhoushan,Zhejiang316022)Abstract『Objective]ToexploreoptimaIextractionprocessforCylcinasinensispepti

4、des.『Methods]Cylcinasinensiswashydrolyzedwithtrypsintogetpeptides;theconditionsofhydrolysiswereoptimizedaccordingtoitsantitumoractivityonPC-3cell;solidtoliquidratio,extrac—tiontimes,temperature,pHandenzymeconcentrationwerestudied;thetechnologyparameterswasdeterminedbythe

5、orthogonaltest.Cylcinasinensishydrolysateswereisolatedbyultra—filtrationandpurifiedusingG-25ge1filtration.1Resultsl,rhebestconditionsofenzymatichydrolysisweretemperatureof45。C,pH7.0,enzymeconcentrationof300U/g,solid—liquidratioof1:3,andtimeof6h.Aftergelfiltration,threean

6、-ticancerpeptidefractionswerecollected.Peak1andpeak2hadthehigheranticanceractivity.『Conclusion]Takinginhibitionofcellprolifer.ationasindicatorscaneffectivelyextractclamCylcinasinensispeptidesandoptimizeprocessroutes.KeywordsCylcinasinertsispeptides:Cellproliferationinhib

7、itionrate;Isolationandpurification青蛤(CylcirmsinensisGmelin)隶属软体动物门、瓣鳃纲、为国药分析纯。帘蛤目、帘蛤科,俗称黑蛤、圆蛤、铁蛤等,是我国沿海地区常1.2主要仪器与设备DS一1型高速组织捣碎机(上海标本见的一种贝类。青蛤属于海洋高蛋白食品,具有较高的食用模型厂);722S可见分光光度计(上海恒平科学仪器有限公价值与经济价值,是我国沿海城市的主要经济来源之一。司);BSA124S型电子天平(德国SartoriusAG公司);超滤杯、从海洋贝类中提取活性物质是近年来的研究热点。

8、研究表滤膜等(上海摩速科学器材有限公司);倒置显微镜(OLYM—明,青蛤肉提取液能显著提高脾脏淋巴细胞、淋巴结巨噬细PUS公司);SSW型微电脑电热恒温槽(上海博迅实业有限公胞和巨噬细胞酸性酯酶的活性,具有

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