泥螺多肽酶解工艺的优化及其体外抗肿瘤活性的初步研究.pdf

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1、食品科技2o13年第38卷第l凋FOODSCIENCEANDTECHNOLOGY添加剂与调味品混螺多目太酶解工艺的=jl及其体▲抗肿瘤活性的初步研究曹玉昊，马剑茵(浙江海洋学院食品与医药学院，舟山316004)摘要：采用木瓜蛋白酶水解海洋生物泥螺的软体组织，进行多肽的抗肿瘤活性研究。通过单因素实验和正交实验来确定最佳酶解条件，采用MTT实验方法探索泥螺多肽的抗肿瘤活性。结果表明，当酶解条件为温度40℃、料液比l：1、pH6、酶解时间8h、加酶量0．36％时，泥螺软体组织经木瓜蛋白酶水解制备所得的多肽的氨基氮含量最高(1．62

2、mg／mE)，并且对肺癌A一549~m胞和前列腺癌PC一3细胞的体外增殖表现出一定的抑制作用。关键词：泥螺多肽；木瓜蛋白酶；肺癌；前列腺癌；酶解条件中图分类号：R284文献标志码：A文章编号：1005—9989(2013)12—0265—03Optimizationofenzymatichydrolysisprocessofbullactaexaratapeptideandanti—tumoractivityinvitroCAOYu—hao，MAJian-yin(SchoolofFoodandPharmacy，Zhejian

3、gOceanUniversity，Zhoushan316004)Abstract：Studiedsofttissueofbullactaexaratawhichhydrolyzedbythepapainforanti-tumoractivityofthepolypeptide．Wedeterminedtheoptimalhydrolysisconditionsthroughsinglefactorexperimentandorthogonalexperiment，andresearchedpeptidesantitumora

4、ctivityofbullactaexaratawhichdeterminedbytheMTTmethod．Theresultsshowedthattheaminonitrogencontentwashighest(1．62mg，mL)，whichobtainedbypapainhydrolysisofpeptideinsofttissueofbullactaexaratawhentheenzymolysisconditionswasat40℃temperature，solid—liquidratiowas1：1，pHval

5、uewas6，reactiontimewas8hours，enzymedosagewas0．36％，anditshowedsomeinhibitionfunctionforpropagationofA一549celloflungcancerandPC一3cellsofprostatecancerinvitro．Keywords：peptidesofbullactaexarata；papain；lungcancer；prostatecancer；emzymatichydrolysisconditions抗菌肽是一类广泛存在于生

6、物体内的小分子菌活性外，对真菌、病毒和肿瘤细胞均有一定的多肽，是机体非特异性免疫中的一类重要的免疫抑制作用。研究显示【，抗菌肽不仅是重要的抑菌应答因子。据报道【”，抗菌肽除了具有较好的抗细活性物质，还是生物机体抵御病原微生物感染、收稿日期：2013—06—18通讯作者作者简介：曾玉~(1985_)，男(满族)，硕士研究生，研究方向为海洋生物。’265,蘸食品科技FOODSCIENCEANDTECHNOLOGY2013年第38卷第1凋介导内源免疫应答的关键因子。V为空白实验加入甲醛后滴定至终点所海洋生物多肽是目前海洋生物活性物

7、质研究消耗的NaOH标准溶液的体积；的一个重要领域。舟山群岛素以“渔盐之利、舟c为NaOH标准溶液的浓度；楫之便”而扬名于世。泥螺遍布于舟山各港湾海0．014为氮的毫摩尔质量；涂，尤其以普陀朱家尖、定海长白泥螺为最，年v为酶解液定容体积。产量在1．5万t。目前采用木瓜蛋白酶从泥螺中提取2．2单因素实验探索酶解工艺条件多肽在国内外尚未见报道。本文首次就木瓜蛋白用高速组织捣碎机将泥螺组织捣碎匀浆，用酶酶解泥螺制备多肽进行了研究，为今后酶解法缓冲液调pH，加入木瓜蛋白酶酶解数小时，100对软体动物多肽的深人研究和开发利用提供科学℃

8、下灭酶15min，4oC下离1~,15min(10000r／min)。依据，并极可能为水产养殖业的病害防治，食品取上清液，采用甲醛电位滴定法测定氨基态氮加工中防腐剂的研究，畜禽业饲料添加剂研究等(AAN)含量。用单因素实验分析酶解温度、pH、领域提供科学的借鉴具有重要意义。时间及加酶量对氨