桑黄多酚的提取及其体外抗氧化、抗肿瘤活性研究

《桑黄多酚的提取及其体外抗氧化、抗肿瘤活性研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、江苏大学硕士学位论文桑黄多酚的提取及其体外抗氧化、抗肿瘤活性研究姓名：冯子旺申请学位级别：硕士专业：外科学指导教师：俞力超20120531江苏大学硕士学位论文摘要目的优化药用真菌桑黄多酚的超声提取工艺，并对其多酚进行体外抗氧化及抗肿瘤活性研究。方法在单因素实验的基础上，采用正交设计和响应面设计方法优化桑黄多酚的超声提取工艺，并测定桑黄多酚清除DPPH自由基、·OH自由基的能力，Fe3+还原能力，还原力来评价其体外抗氧化清除氧自由基的能力。采用MTT法检测桑黄中酚类化合物对人肺癌A549细胞株抑制增殖作用，应用Annexin．V／

2、PI双染检测细胞凋亡率，应用JC．1荧光探检测其线粒体膜电位的变化，从而分析其抗肿瘤机理。结果桑黄多酚的超声提取过程中乙醇浓度、超声时间、超声温度、料液比对多酚得率影响较大。在单因素的基础上依据中心法则采用响应面设计优化得到桑黄多酚的超声提取最优工艺为：以60％乙醇为提取溶剂，超声提取时间27min，超声提取温度50℃，料液比1：25，在此条件下桑黄多酚提取率可达28．6mg·g-1。桑黄多酚有较强的清除DPPH及·OH自由基的能力、有较强的Fe3+还原能力及较强的还原力。桑黄酚类化合物明显抑制人肺癌细胞株A549的增殖，48h

3、时对人肺癌A549细胞株的IC50为73．31．tg’mL～，并可诱导肿瘤细胞凋亡及明显的降低线粒体膜电位。结论采用超声辅助提取桑黄多酚，时间短、得率高，是一种高效、快捷的方法。桑黄多酚有较强的清除DPPH自由基及·OH自由基的能力、有较强的Fe3+还原能力及较强的还原力，说明其表现出较强桑黄多酚的提取及其体外抗氧化、抗肿瘤活性研究体外抗氧化清除氧自由基的能力。桑黄酚类化合物对人肺癌A549细胞体外试验研究结果表明其可以明显的抑制肿瘤细胞的增殖，其机制可能与诱导细胞凋亡及影响肿瘤细胞线粒体功能有关。关键词桑黄，酚类化合物，超声提

4、取，响应面设计，抗氧化，抗肿瘤，凋亡，线粒体膜电位II江苏大学硕士学位论文ABSTRACTObjectiveToinvestigatetheoptimizedextractionprocessoftotalpolyphenolsfromPhellinusigniariusandevaluateitsantioxidantandantitumoractivityinvitro．MethodsOrthogonaltestandresponsesurfacemethodologybasedonsingle—factorexperime

5、ntswereusedtooptimizeultrasonic—assistedextractionfortotalpolyphenolsfromPhellinusigniarius．AntioxidantactivityofpolyphenolswereevaluatedbyDPPH、。OHradicalscavengingactivity,Fe3+andreducingpower．MTTassaywasusedtodetecttheeffectofpolyphenolsonproliferationofthehumanlun

6、gcancerA549cells．Cellcycleapoptotiewasdetectedbyflowcytometry(FCM)followingPIstaining，mitochondrialmembranepotentialwasmeasuredbyfluorescentJC-1staining．ResultTheextractionsolvent，extractiontime，extractiontemperatureandmaterialtosolventratioarethemainimpactfactorstot

7、hePhellinusigniariuspolyphenolsyieldintheprocessofultrasonicextraction．Theresponsesurfacemethodologycombinedwithcentralcompositiondesign(CCD)basedonsingle·factorexperimentswereusedtooptimizeultrasonic-assistedextractionforpolyphenolsfromPhellinusigniarius．Theresultin

8、dicatedthatthehighestextractionrateoftotalpolyphenolsby桑黄多酚的提取及其体外抗氧化、抗肿瘤活性研究ultrasonic—assistedextractioncouldarriveat28．6mg·g-1wi