甜草总多酚体外抗氧化活性研究

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1、甜草总多酚体外抗氧化活性研究苟体忠ａ，ｂ，雷小朋ｃ，徐绍琴ｄ，孙大方ａ，陈永婷ａ，彭章美ａ（凯里学院，ａ．化学与材料工程学院；ｂ．应用化学研究所；ｃ．人事处；ｄ．继续教育学院，贵州凯里５５６０１１）摘要：采用总抗氧化能力、ＯＨ·清除率、ＤＰＰＨ·清除率来考察甜草（ＯｌｄｅｎｌａｎｄｉａｃａｎｔｏｎｅｎｓｉｓＨｏｗ）总多酚的体外抗氧化活性。结果表明，甜草总多酚总抗氧化能力略小于维生素Ｃ（ＶＣ），但甜草总多酚ＯＨ·清除率远高于ＶＣ。此外，甜草总多酚对ＤＰＰＨ·的ＩＣ５０（２２．２μｇ／ｍＬ）与ＶＣ相近（１６．０μｇ／ｍＬ）。甜草总

2、多酚是天然的抗氧化活性剂和自由基清除剂。..关键词：甜草（ＯｌｄｅｎｌａｎｄｉａｃａｎｔｏｎｅｎｓｉｓＨｏｗ）；总多酚；抗氧化活性；ＯＨ·清除率；ＤＰＰＨ·清除率中图分类号：Ｒ９６１；Ｓ５６７．２１文献标识码：Ａ：０４３９－８１１４（２０１５）０4－０947－０３ＤＯＩ：１０．１４０８８／ｊ．ｃｎｋｉ．ｉｓｓｎ０４３９－８１１４．２０１５．０4．０44收稿日期：２０１４－０６－３０基金项目：贵州省科学技术厅自然科学基金项目［黔科合Ｊ字（２０１１）２０７９号］；凯里学院博士专项基金；贵州省高校优秀科技创新人才计划项目［黔教合ＫＹ

3、字（２０１２）０９９号］；贵州省教育厅高层次人才引进项目（院科通（２０１２）７号）；凯里学院重点项目（Ｚ１２０２）；贵州省特色重点学科资助项目［黔教高发（２０１１）２０８号］；凯里学院重点学科资助项目［院通字（２０１０）８６号］简介：苟体忠（１９８１－），男，贵州桐梓人，副教授，博士，主要从事天然药物化学研究，（）１５２８６３９８５１２（电子信箱）ｇｔｚ８１０１１０＠１２６．ｃｏｍ。甜草（ＯｌｄｅｎｌａｎｄｉａｃａｎｔｏｎｅｎｓｉｓＨｏｗ），又名野甘草、山甘草，是双子叶茜草科植物广州耳草的全草，其性平，味甘，具有清热解毒之功效

4、。甜草主要分布在广东、江西等地。目前，甜草已被简单加工为类似于茶叶的保健品，晒干的全草经开水浸泡即可饮用。蓝文建等［１，２］从甜草乙醇提取物中分离得到了五环三萜化合物，该化合物对胃腺癌细胞和肝癌细胞具有抑制作用。但甜草多酚抗氧化活性的研究尚未见报道，因此，本研究分析了甜草总多酚的抗氧化活性，从而为甜草的综合利用提供理论依据。１材料与方法１．１材料１．１．１样品甜草样品购于２０１３年７月的凯里第二届民间工艺品博览会。甜草成品于８０℃烘箱中烘干，再用粉碎机粉碎并过２００目尼龙筛，待用。１．１．２仪器与试剂紫外分光光度计（ＵＶ－２５

5、５０型，岛津）；植物粉碎机（北京科伟永兴仪器有限公司）；水浴振荡器（ＳＨＡ－Ｃ型，巩义予华仪器有限公司）；超声波清洗机（ＷＨ－３００型，济宁万和超声电子设备有限公司）；低速离心机（ＴＤ５Ｍ型，长沙湘智离心机仪器有限公司）；电子天平（上海衡平仪器仪表厂）。三氯乙酸、没食子酸均为分析纯，１，１－二苯－２－苦基肼自由基（ＤＰＰＨ自由基）、Ｆｏｌｉｎ-Cｉｏｃａｌｔｅｕ’ｓ酚试剂为ａｌａｄｄｉｎ试剂。１．２方法１．２．１样品处理与总多酚的提取称取约２ｇ上述样品于５０ｍＬ离心管中，依次用石油醚、二氯甲烷、８０％乙醇连续提取，其工艺条件经

6、正交试验确定最佳萃取条件为：料液比为１∶２０（ｇ∶ｍＬ），２４０Ｗ超声波间歇提取２次，每次３０ｍｉｎ，离心取上层清液合并，再置于５０ｍＬ容量瓶中并用相应试剂定容至刻度，摇匀，待测。１．２．２总多酚测定总多酚含量的测定参照文献［３］并稍作修改。其简要流程为：准确称取０．１２５ｇ没食子酸以去离子水定容至１０００ｍＬ。分别吸取该标准溶液０、１、２、３、４、５ｍＬ于６个２５ｍＬ比色管中，先加去离子水至１０ｍＬ，摇匀，再加入Ｆｏｌｉｎ－Ｃｉｏｃａｌｔｅｕ（ＦＣ）酚试剂１．０ｍＬ，混匀，然后加入６．０ｍＬ１０％Ｎａ２ＣＯ３溶液，并用去离子

7、水定溶至刻度，摇匀。然后在暗室中放置２ｈ，并于７６０ｎｍ波长下测定其吸光度。以没食子酸浓度（Ｃ）为横坐标，吸光度（Ａ）为纵坐标，绘制标准曲线，其回归方程为：Ａ＝０．０８３５Ｃ＋０．０２（ｒ＝０．９９９８）。取乙醇提取液０．２ｍＬ于２５ｍＬ比色管中，按上述步骤测定其吸光度，再根据回归方程计算样品溶液总多酚的浓度，并以此计算样品总多酚含量，以每克样品中没食子酸当量表示（ｍｇＧＡＥ／ｇ）。１．２．３醇提物总抗氧化能力测定总抗氧化能力的测定方法参照文献［４］，其简要流程为：取１ｍＬ不同浓度的提取液，并依次加入２．５ｍＬ的ｐＨ６．６的磷

8、酸盐缓冲液和１％铁氰化钾［Ｋ３Ｆｅ（ＣＮ）６］溶液，摇匀并置于５０℃水浴振荡器中２０ｍｉｎ。然后加入２．５ｍＬ１０％三氯乙酸溶液，摇匀并取混液２．５ｍＬ，再加入２．５ｍＬ去离子水以及０．１％氯化铁溶液，摇匀并静置１０ｍｉｎ，在７００ｎｍ处测定吸光度（Ａｓ），以超纯水代替提取液