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《Survivin-ASODN对肝癌SMMC-7721细胞凋亡的促进作用及其机制-论文.pdf》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、第4O卷第4期吉林大学学报(医学版)Vo1.40No.42014年7月JournalofJilinUniversity(MedicineEdition)Ju1.2014757[文章编号]1671—587X(2014)04—0757—06DOI:10.13481/j.1671—587x.20140413Survivin—ASODN对肝癌SMMC-7721细胞凋亡的促进作用及其机制齐亚灵,赵文杰,方艳秋。,陈玉强,孟德欣,王伟群,李尧,李文(1.佳木斯大学基础医学院组织与胚胎学教研室,黑龙江佳木斯1540
2、07;2.黑龙江省农垦二院内科,黑龙江佳木斯154002;3.吉林省人民医院肿瘤生物治疗中心,吉林长春130021;4.佳木斯大学附属第一医院普外科,黑龙江佳木斯154000;5.佳木斯大学基础医学院生理学教研室,黑龙江佳木斯154O07)[摘要]目的:应用反义寡核苷酸(ASODN)技术靶向抑制生存素(survivin)基因,研究其对肝癌SMMC一7721细胞凋亡的影响,阐明survivin反义寡核苷酸(survivin-ASODN)促进SMMC-7721细胞凋亡的作用机制。方法:设计合成surviv
3、in-ASODN序列(FAM荧光素标记)。利用脂质体介导法分别用浓度为100、200、300、400和600nmol·Lsurvivin-ASODN转染SMMC-7721细胞(ASODN转染组),并设空白对照组、空脂质体对照组和正义寡核苷酸(SODN)对照组。应用流式细胞术(FCM)检测不同浓度survivin-ASODN体外转染SMMC一7721细胞24、48和72h后SMMC-7721细胞凋亡率及细胞周期;Westernblotting法检测survivin蛋白表达水平。结果:与各对照组比较,荧光
4、素标记的ASODN转染SMMC一7721细胞24h后,细胞生长开始受到抑制,细胞凋亡率增加,呈现剂量一时间依赖性(P%0.05);作用48h后,ASODN转染组细胞在G期前出现明显的亚二倍体凋亡峰,G。/G期细胞明显减少(P<0.05),G/M期细胞显著增加(P<0.05),细胞被阻滞于Gz/M期。与各对照组比较,不同浓度ASODN转染组SMMC一7721细胞survivin蛋白表达水平下降(P5、vin蛋白表达、改变细胞周期进程等机制促进SMMC-7721细胞凋亡,并且呈现时间一剂量依赖性。[关键词]生存素;反义寡核苷酸;肝细胞癌;流式细胞术;转染[中图分类号]R733[文献标志码]APromotioneffectsofsurvivin—ASODNonapoptosisofSMMC-7221cellanditsmechanismQIYa—ling,ZHAOWen-jie,FANGYan-qiu。,CHENYu—qiang,MENGDe—xin,WANGWei—qun,LIYao,LIWen(16、.DepartmentofHistologyandEmbryology,JiamusiUniversity,Jiamusi154007,China;2.DepartmentofInternalMedicine,SecondNongkenHospitalofHeilongjiangProvince,Jiamusi154002,China;3.TumorBiotherapyCenter,People’SHospitalofJilinProvince,Changchun130021,China;4.Depa7、rtmentofGeneralSurgery,FirstAffiliatedHospital,JiamusiUniversity,Jiamusi154002,China;5.DepartmentofPhysiology,SchoolofBasicMedicalSciences,JiamusiUnversity,Jiamusi154007,China)Abstract:ObjectiveTostudytheinfluenceofsurvivintargetedlyinhibitedwithantisen8、seoligonucle0tide(ASODN)techniqueontheapoptosisofhepatomacarcinomacellsSMMC一7221,andtoclarifythemechanismofpromotioneffectofsurvivin-ASODNontheapoptosisofSMMC一7721cells.MethodsTheASODNsequenceofsurvivinmarkedbyFAMfluoresceinwasde
5、vin蛋白表达、改变细胞周期进程等机制促进SMMC-7721细胞凋亡,并且呈现时间一剂量依赖性。[关键词]生存素;反义寡核苷酸;肝细胞癌;流式细胞术;转染[中图分类号]R733[文献标志码]APromotioneffectsofsurvivin—ASODNonapoptosisofSMMC-7221cellanditsmechanismQIYa—ling,ZHAOWen-jie,FANGYan-qiu。,CHENYu—qiang,MENGDe—xin,WANGWei—qun,LIYao,LIWen(1
6、.DepartmentofHistologyandEmbryology,JiamusiUniversity,Jiamusi154007,China;2.DepartmentofInternalMedicine,SecondNongkenHospitalofHeilongjiangProvince,Jiamusi154002,China;3.TumorBiotherapyCenter,People’SHospitalofJilinProvince,Changchun130021,China;4.Depa
7、rtmentofGeneralSurgery,FirstAffiliatedHospital,JiamusiUniversity,Jiamusi154002,China;5.DepartmentofPhysiology,SchoolofBasicMedicalSciences,JiamusiUnversity,Jiamusi154007,China)Abstract:ObjectiveTostudytheinfluenceofsurvivintargetedlyinhibitedwithantisen
8、seoligonucle0tide(ASODN)techniqueontheapoptosisofhepatomacarcinomacellsSMMC一7221,andtoclarifythemechanismofpromotioneffectofsurvivin-ASODNontheapoptosisofSMMC一7721cells.MethodsTheASODNsequenceofsurvivinmarkedbyFAMfluoresceinwasde
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