ARK5在肝癌组织中的表达及其对肝癌SMMC-7721细胞生长的影响-论文.pdf

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1、第4O卷第4期吉林大学学报(医学版)Vo1．40No．42014年7月JournalofJilinUniversity(MedicineEdition)Ju1．2014743[文章编号]1671—587X(2014)04—0743—05DOI．10．13481／i．1671—587x．20140410ARK5在肝癌组织中的表达及其对肝癌SMMC一7721细胞生长的影响蒋清虎，罗伟，温路，胡惠雯，邓大炜，吴忠均(重庆医科大学附属第一医院肝胆外科，重庆400016)[摘要]目的：检测ARK5在肝癌组织及肝癌SMMC一7721细胞中表达水平，探讨其对

2、肝癌细胞生长的作用。方法：采用PCR和Westernblotting法检测3O例肝癌组织及癌旁组织、正常肝细胞LO2及肝癌SMMC一7721细胞中ARK5mRNA和蛋白表达水平；合成ARK5的小干扰RNA(siRNA)和阴性对照siRNA，转染至SMMC-7721细胞分别为实验组和阴性对照组，同时设空白对照组，采用MTT法和流式细胞术检测各组肝癌细胞的增殖活性和细胞凋亡率。结果：PCR和Westernblotting法检测，肝癌组织和肝癌SMMC-7721细胞中ARK5mRNA和蛋白表达水平明显高于癌旁组织和L02细胞(P<0．05)。MTT法

3、检测，实验组24、48和72h细胞生长抑制率分别为(19．39±5．42)、(23．194-0．53)和(20．74土1．23)，均高于空白对照组和阴性对照组(P

4、NA干扰；ARK5基因；SMMC一7721细胞[中图分类号]R735．7[文献标志码]AExpressionofARK5inhepat0cellularcarcinomatissueanditseffectongrowthofSMMC——7721cellsJIANGQing—hu，LUOWei，WENLu，HUHui—wen，DENGDa-wei，WUZhong—jun(DepartmentofHepatobiliarySurgery，FirstAffiliatedHospital，ChongqingMedicalUniversity，Chon

5、gqing400016，China)Abstract．ObjectiveTodetecttheexpressionofARK5inhepatocellularcarcinoma(HCC)tissueandhepatomaSMMC一7721cells，andtoinvestigateitseffectonthegrowthofhepatomacells．MethodsTheexpressionlevelsofARK5mRNAandproteinweredeterminedbyRT-PCRandWesternblottingin30casesofH

6、CCtissue，paracarcinomatissue，SMMC-7721cells，andhepaticcellsL02．TheSiRNAofARK5andnegativecontrol(NC)siRNAwereconstructedandtransfectedintotheSMMC-7721cells，andusedasexperimentalgroupandnegativecontrolgroup；atthesametimeblankcontrolgroupwassetup．Theproliferationactivityandapop

7、toticrateoftransfectedcellsweredetectedbyMTTassayandflowcytometry(FCM)．ResultsThePCRandWesternblottingresultsshowedthattheexpressionlevelsofARK5mRNAandproteininHCCtissueandSMMC-7721cellsweresignificantlyhigherthanthoseinparacarcinomatissueandLO2cells(P<0．05)．TheMTTassayresul

8、tsdemonstratedthattheinhibitoryratesofgrowthoftransfectedcellsinexperimenta