RNAi cyclin E对肝癌细胞生长的影响-论文.pdf

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1、河南医学研究2014年5月第23卷第5期HENANMEDIcALRESEARCHMay2014．Vo1．23。No．5[9]FongCW，ChuaMS，MckieAB，eta1．Sprouty2，aninhibitorofmi-细胞癌中的表达及意义[J]．中华实验外科杂志，2013，30togen·activatedproteinkinasesignalingisdown—regulatedinhepato-(6)：1314．celluarcareinoma[J]．CancerRes，2006，66(4)：2048-205

2、8．[12]BerraE，BenizriE，GinouvesA，eta1．HIFprolyl-hydroxylase2isthe[1O]LeeCC，PutnamAJ，MirantiCK，eta1．Overexpressionofsprout2keyoxygensensorsettinglowsteady-·statelevelsofHIF-·lalphainnor-inhibitsHGF／SF—mediatedcellgrowth，invasion，migration，andcyto-moxia[J]．EmboJ，2003

3、，22(16)：40824090．kinesis[J]．Oncogene，2004，23(30)：5193-5202．(收稿日期：2014-01-29)范正军，孙涛，彭飞，等．SIAH2与细胞外信号调节激酶I／2在肝RNAicyclinE对肝癌细胞生长的影响贾海全(安阳市肿瘤医院胸一科河南安阳455000)摘要：目的：探讨RNAicyclinE对肝癌细胞生长的影响。方法：肝癌细胞系HepG2采用体外培养，选取siRNA合成双链发卡样DNA；将其重组入pGFP-V-RS得到重组子pGFP．V．RS．siCE951和pGFP．

4、V．RS．siCEl122；两重组子分别进行DNA序列测定、同源性比较；将两重组子和pGFP—V-Con分别转入人肝癌HepG2细胞中，同时设空白对照组(不转染任何质粒，仅加转染试剂)。检测4组HepG2细胞cyclinEmRNA表达情况及细胞的增殖情况。结果i经过同源性检索和优选确定cyclinE基因的siRNA载体pGFP．V．RS．siCE951和pGFP-V·RS·siCE1122；干扰1组(转染pGFP-V-RS-siCE951)和干扰2组(转染pGFP—V-RS-siCE1122)细胞cyclinEmRNA的相

5、对表达量显著低于空白对照组和无关siRNA对照组(P<0．05)；干扰1组和干扰2组与空白对照组和无关siRNA对照组比较，在3、4、5d细胞孔内的吸光度值显著减少，差异有统计学意义(P<0．05)。结论：siRNA载体pGFP—V-RS·siCE951和pGFP—V-Rs—siCE1122转染人肝癌HepG2细胞能显著降低细胞cyclinE基因的表达，是理想的siRNA靶区段。抑制肝癌HepG2细胞cyclinE基因表达，可以降低肝癌HepG2细胞的生长速度。关键词：周期蛋白E；HepG2；肝癌；增殖中图分类号：R365

6、doi：10．3969／j．issn．1004-437X2014．05．004TheefectofRNAicyclinEongrowthoflivercancercellJIAHaiquan(DepartmentofThoracicSurgery，AnyangCityTumorHospital，Anyang455000，China)Abstract：Objective：ToinvestigatetheeffectsofRNAicyclinEOilgrowthoflivercancercells．Methods：HepG2c

7、elllinewasculturedinvitro．TheselectedsiRNAwereformedintodouble—strandedhairpinDNA．TworecombinantsofpGFP—V-RS—siCE951andpGFP—V—RS—siCE1122wereobtainedbyinsertionofhairpinDNAintopGFP—V—RS．DNAsequencesweredeterminedandge—netichomologywerecomparedintworecombinants．The

8、tworecombinantsandpGFP-V-ConweretransfectedintoHepG2cells，theblankcontrolgroup(addedbytransfectionreagentwithoutanytransfectionofplasmid)wassetup．Theexp