绿茶提取物对人肝癌细胞株SMMC-7721体外凋亡的影响.pdf

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1、天然产物研究与开发NatProdResDev2014，26：770~73，786文章编号：1001-6880(2014)5-0770-05绿茶提取物对人肝癌细胞株SMMC．7721体外凋亡的影响蒲霞，郭庆喜，任美萍，杨成万，龙汉安h‘泸州医学院病理教研室；泸州医学院药理学教研室泸州646000摘要：从茶多酚中分离提纯表没食子儿茶素没食子酸酯(Epigallocatechingallate，EGCG)单体。体外培养人肝癌SMMC-7721细胞，采用不同浓度的EGCG对其进行干预，用流式细胞仪检测其对肝癌细胞凋亡的影响；免疫细胞化学法和RT-PCR检测EG

2、CG作用于SMMC-7721细胞后对Survivin、突变型P53mRNA和蛋白表达的影响。结果显示在EGCG的作用下，SMMC-7721凋亡明显增加(P<0．05)；Survivin和突变型P53蛋白和mRNA表达水平均下调(P<0．05)。表明EGCG可能通过下调人肝癌细胞株Survivin和突变型p53的表达，进而促进人肝癌细胞株SMMC-7721凋亡，以达到抗癌作用。关键词：表没食子儿茶索没食子酸酯；肝癌细胞；凋亡；Surdvin；突变型I)53中图分类号：R735．7；s571．1文献标识码：AEfectofEpigallocatechinG

3、allateExtractedfromGreenTeaontheApoptosisofHumanHepatocellularCarcinomaCellLineSMMC-7721／nvitro．PUXia，GUOQing—xi，RENMei—ping，YANGCheng-wan，LONGHan—anDepartmentofPathology，LuzhouMedicalCollege；DepartmentofPharmacology，1．azhouMedialCollegeLuzhou646000，ChinaAbstract：Inthisstudy，epi

4、gallocatechingallate(EGCG)Wa$isolatedandpurifiedfromgreenteapolyphenols．TheefectofEGCGonculmredhumanhepatomaSMMC-7721ceilswasinvestigated．TheapoptosisofculturedSMMC-7721celsindiferentconcentrationsofEGCGweredetectedusingflowcytometry．TheexpressionsofmRNAandproteinofSurvivin，P53i

5、nSMMC-7721cellstreatedwithEGCGweredetectedbyreveretranscfiption-polymerasechainreaction(RT-PCR)andimmunocytochemistrytechnique，respectively．TheresultsshowedthataftertreatingwithEGCG，theap-optosisofSMMC-7721cellssignificantlyraised(P<0．05)；theexpressionlevelsofproteinandmRNAofSur

6、vivinandP53weredown—regulated(P<0．05)．TheseresultsindicatedthattheantineoplasticefectofEGCGwaspossiblyin—ducedthroughdirectlyorindirectlyinhibitingexpressionsofSurvivinandI)53．Keywords：EGCG；humanhepatocellularcarcinomacelline；apoptosis；Survivin；P53绿茶在我国有着悠久的种植和饮用历史，其主1材料与方法要成分是茶

7、多酚，而茶多酚中大部分为儿茶素(cat—echin)，其中表没食子儿茶素没食子酸酯[(一)epi—1．1材料galloeatechin-3一gallate，EGCG]含量最高，是绿茶最主1．1．1细胞株要的功效成分⋯。最近的研究表明，EGCG不仅具人肝癌细胞株SMMC-7721购于中国科学院上有抗菌、抗病毒、抗氧化、降血糖、神经保护等多种生海生物研究所细胞库。物学活性和药理作用，而且还对多种肿瘤具有抑制1．1．2主要试剂与仪器作用．3J，但具体作用机制尚不清楚。本实验选择EGCG标准品购自Sigma公司；流式细胞仪凋在人肝癌细胞凋亡过程中发挥重要作用的

8、Survivin亡试剂盒AnnexinV—F1TCKit购自BECKMAN公和P53进行研究，