没食子酸体外诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的机制研究.pdf

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1、中药新药与临床药理2014年3月第25卷第2期·1l7··药效与毒理学研究·没食子酸体外诱导人肝癌SMMC一7721细胞凋亡的机制研究李沐涵，王明艳，陈海彬，周红光，李文婷，吴勉华(南京中医药大学，江苏南京210023)摘要：目的研究没食子酸(gallicacid，GA)体外诱导人肝癌SMMC一7721细胞凋亡及其作用机制。方法体外培养人肝癌SMMC一7721细胞，噻唑蓝(MTT)法观察细胞增殖；Hoechst一33258、AnnexinV—FITC／PI检测细胞凋亡情况；逆转录聚合酶链式反应(RT—PCR)法研究凋亡抑制基因SurvivinmRNA的变化。结果6．25～50Ixmol·L

2、GA可抑制SMMC一7721细胞的生长，并呈剂量依赖性；不同剂量的GA作用48h后，SMMC一7721细胞出现明显的凋亡形态，细胞凋亡率有显著的剂量依赖性。RT—PCR法检测结果显示，GA能明显抑制肝癌细胞中SurvivinmRNA的表达。结论GA可抑制人肝癌SMMC一7721细胞的增殖，这可能与下调凋亡抑制基因Survivin有关。关键词：没食子酸；SMMC一7721细胞；细胞凋亡；Survivin中图分类号：R285．5文献标志码：A文章编号：1003—9783(2014)02—0117—05doi：10．3969~．issn．1003—9783．2014．02．001StudyofG

3、allicAcidinInducingHumanHepatomaSMMC-7721CellsApoptosisandItsMechanismLIMuhan，WANGMingyan，CHENHaibin，ZHOUHongguang，LIWenting，WUMianhua(NanjingUniversityofChineseMedicine，Nanjing210023Jiangsu，China)Abstract：ObjectiveToinvestigatetheinhibitionofgallicacid(GA)ongrowthofhumanhepatomaSMMC-7721cellsinvi

4、troandtoexploreitspotentialmechanism．MethodsSMMC一7721ceilswereculturedinvitro．Methylthiazolyltetrazolium(MTF)assaywasusedtoobservethegrowthofSMMC一7721cells．ApoptosisofthecellswasanalyzedbyHoechest-33258staining．AnnexinV-FITC／PIstainingwasusedtoquanti~thepercentagesofapoptoticcellinthetotalcellpopu

5、lation．SurvivinmRNAexpressionwasinvestigatedbyreversetranscriptionpolymerasechainreaction(RT—PCR)．ResultsTheresuhsofMTFassayshowedthat6．25～50Ixmol·LofGAcouldsignificantlyinhibittheproliferationofSMMC-7721cellsindose-dependentmanner．Hoechest一33258stainingresultspresentedobviousapoptoticmorphologyof

6、SMMC-7721cellstreatedwithGAatvariousconcentrationsfor48h．TheresultsofAnnexinV-FITC／PId0uhle—stainingindicatedthattheapoptoticrateincreasedsignificantlywithGAind0se—rlependentmanner．RT-PCRresultsshowedthattheexpressionofSurvivinmRNAdeclinedinGAgroups．ConclusionGAcaninhibitthegrowthofhumangastriccan

7、cercellsandinducecellsapoptosis．Itsmechanismmaybeassociatedwithdown-regulatingsurvivinmRNAexpression．Keywords：Gallicacid；SMMC一7721；Cellapoptosis；Survivin原发性肝癌是居世界死亡率第三位的癌症。我术和化学治疗为主的综合治疗，但总体预后较差，国是乙型肝炎感染人群最多的国家，肝