烟草中游离氨基酸的分离分析方法研究

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1、云南大学硕士研究生学位论文摘要摘要游离氨基酸是生命体中一类重要的生物有机小分子，在生命体中扮演着重要角色。对烟草而言，游离氨基酸对烟草的香、吃味，烟草品质及可用性有重大影响。氨基酸的分离与分析一直是生物有机小分子分离分析中的热门课题，目前已研究过多种分离分析方法，这些方法各有优缺点，至今还没有一种大家广泛认可的标准化方法。本课题运用不同的分离技术以及检测手段对游离氨基酸的分离分析方法做了比较系统的研究，并且系统地比较了不同分离分析方法以及不同定量方法的特点。研究开发了四种以液体为流动相的游离氨基

2、酸色谱分离分析方法，并已成功运用于烟草中的游离氨基酸的分析测定，结果令人满意。本课题中研究开发的四种氨基酸分离分析方法包括:邻苯二甲醛衍生化氨基酸的高效液相色谱分离分析方法;非衍生化氨基酸的高效毛细管电泳分离分析方法;非衍生化氨基酸的液质联用分离分析方法:非衍生化氨基酸的毛细管电泳/质谱联用分离分析方法。这些方法都是目前运用较多或前景较好的氨基酸分离分析方法。本课题对上述方法以及气相色谱法的特点进行了讨论和比较。其中包括气相色谱法与液相色谱法的比较，衍生化方法与非衍生化方法的比较，联机技术与普通

3、色谱技术的比较以及外标法与内标法的比较。本课题以植物体(主要是烟草)中游离氨基酸为研究对象，在分离分析方面做了大量的基础性研究，对氨基酸系统分析方法的建立以及分析标准的制定提出了一些有益的建议，并且具有切合实际的参考价值。关键词:游离氨基酸、衍生化、非衍生化、高效液相色谱、毛细管电泳、液质联用、毛细管电泳质谱联用、分离分析方法。烟草中游离氨基酸的分离分析方法研究冯雷AbstractFreeaminoacidsareimportantorganicsmallmolecules,andactakey

4、roleinlife.Especially,freeaminoacidsarerelatedtotheodor,taste,qualityandusabilityoftobacco.Theseparationandanalysisofaminoacidsisahottopicintheseparationandanalysisoforganicsmallmolecules.Atpresent,anumberofmethods,whichdealingwiththeseparationandana

5、lysisofaminoacids,havebeenpublished.Thesemethodshavetheiradvantageanddisadvantage,andthereisnoanymethodcanbeacceptedbyeveryoneasthestandardmethoduntilnow.Inthisstudy,weapplydiferentseparationanddetectiontechniquetotheanalysisofaminoacids,andthecharac

6、teristicofthesemethodswereobtainedbycomparingthoroughly.Wedevelopedfourchromatographicmethodsinwhichliquidwastakenasmobilephasefortheseparationandanalysisofaminoacids.Thesemethodsinclude:theanalysisofaminoacidsbypre-columnOPAderivatizationofRp-HPLC;t

7、heanalysisofaminoacidsbycapillaryelectrophoresis;theanalysisofaminoacidsbyHPLC/MSandtheanalysisofaminoacidsbyCE/MS.Thesemethodshavebeenusedintobaccoanalysissuccessfullyandareraisingseparationandanalysismethodofaminoacids.Thecharacteristicofabovemetho

8、dsandthecomparisonofthesemethodshavebeendiscussedinthisstudy.WemakecomparisonbetweenGCandHPLC,CEandHPLC,derivatizationandunderivatization,ESTDandISTD,thecombinationinstrumentationtechniqueandordinarychromatograp勿technique.Freeaminoacidsinplants(sucha