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时间:2019-01-06
《高迁移率族蛋白b1对小鼠调节性t细胞foxp3表达的影响》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、高迁移率族蛋白B1对小鼠调节性T细胞叉头翼状螺旋转录因子Foxp3Foxp3?表达的影响张莹,姚咏明,董宁,刘峰,盛志勇(解放军总医院第一附属医院全军烧伤研究所基础部,北京100037)摘要:目的观察高迁移率族蛋白B1(highmobilitygroupboxprotein1,HMGB1)对调节性T细胞(regulatoryTcell,Treg)叉头翼状螺旋转录因子(forkhead/wingedhelixtranscriptionfactorp3headforkboxp3,Foxp3)基因及蛋白表达的影响,并对其机制进行初步探讨。方法免疫磁珠法分离正
2、常BALB/c小鼠脾脏Treg。采用固相包被抗-CD3及可溶性CD28辅助活化,给予HMGB1刺激,观察HMGB1刺激与Foxp3基因及蛋白表达的时间-效应关系及剂量-效应关系。结果经HMGB1刺激后的TregFoxp3蛋白表达于24~72h明显下调(P<0.05或P<0.01),其中以作用48h、72h后表达下调尤为显著(P<0.01);给予不同剂量HMGB1刺激72h后,10ng/ml、100ng/ml、1000ng/ml的HMGB1均可诱导Foxp3表达减弱(P<0.0或P<0.01),其中HMGB1的浓度在1000ng/ml时Foxp3表达下调
3、最明显。Foxp3mRNA表达呈现出与蛋白表达相同的时间、剂量依赖关系。结论HMGB1通过诱导TregFoxp3mRNA表达下调,进一步影响其蛋白产物合成,从而影响Treg免疫调节活性。关键词:高迁移率族蛋白B1;调节性T细胞;Foxp3;免疫调节中图法分类号:R392.12基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划)(2005CB522602);国家自然科学基金(30672178);国家杰出青年科学基金(30125020)SupportedbytheNationalBasicResearchProgram(973Program)grantsfro
4、mtheNationalBasicResearchProgramofChina(No.(2005CB522602),theNationalNaturalScienceFoundation((No.30672178)andtheNationalScienceFundforDistinguishedYoungScholarstheNationalNaturalScienceOutstandingYouthFoundationofChina(30125020)作者简介:张莹,女,河北省涿州市人,医学硕士,主治医师,主要从事创伤感染与免疫的研究。电话:(010
5、)66867394通信作者:姚咏明,电话:(010)66867394,E-mail:c_ff@sina.comEffectofhighmobilitygroupbox-1proteinonFoxp3expressionofspleenregulatoryTcellsinmiceZHANGYing,YAOYong-ming,DONGNing,LIUFeng,SHENGZhi-yong(BurnsInstitute,FirstHospitalAffiliatedtothePLAGeneralHospital(formerly304thHospital),B
6、eijing100037,China)Correspondingauthor:YAOYong-ming,Email:c_ff@sina.com【Abstract】: ObjectiveIntranuclearforkhead/wingedhelixtranscriptionfactor(Foxp3)playsakeyroleinTcell–mediatedimmunosuppression.Thepresentstudywasperformedtoinvestigateeffectsofhighmobilitygroupbox-1protein(HMG
7、B1)onFoxp3geneaswellasproteinexpressionsofsplenicregulatoryTcells(Tregs)anditspotentialregulatingmechanisminmice.MethodsCD4+CD25+TregsisolatedfromthespleensofmaleBABL/cmicebymagneticbeadswereseededon96-well(1×105cells/well)cellcultureplatescoatedwithanti-CD3(1μg/ml)andsolubleant
8、i-CD28(1μg/ml),andthecellswerestimulatedwithHMG
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