foxp3调节性t细胞在喉癌中的表达及意义

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1、Foxp3+调节性T细胞在喉癌中的表达及意义刘昉1李瑞玉1赵苗青2(1福建省立医院耳鼻喉科/福建医科大学省立临床医学院350001)(2山东省立医院病理科)【摘要】目的研究Foxp3+调节性T细胞(Foxp3+Treg)在喉鳞状细胞癌中的表达和临床病理特征关系。方法采用免疫组织化学方法检测36例喉鳞状细胞癌和15例正常喉部组织中Foxp3+Treg的表达，并分析其与临床病理特征的相关性。结果喉癌组织中Foxp3+Treg表达显著多于正常组织，差异显著(P<0.01)；低分化组Foxp3+Treg细胞数

2、明显高于中高分化组(P<0.01)；有颈部淋巴结转移者Foxp3+Treg细胞数高于无颈淋巴结转移者(P<0.05)。结论喉癌组织中Treg细胞增多可能导致肿瘤免疫逃逸，Treg细胞表达受肿瘤相关因素的影响，而其数量变化可能与喉癌的发生发展有直接关系。【关键词】TregFoxp3喉癌免疫组织化学【中图分类号】R730.2【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2012)18-0035-02调节性T淋巴细胞(Treg)是CD4+T淋巴细胞的分支之一，它可通过抑制各种生理性和病理性免疫反应，包括抑

3、制病原微生物、同种器官移植和肿瘤的细胞免疫等，从而维持着机体的自身免疫耐受和免疫稳态。肿瘤微环境中的Treg细胞能够识别肿瘤相关性自身抗原，并能抑制针对肿瘤抗原的T细胞免疫应答,因此Treg细胞在抗肿瘤免疫砬答的免疫抑制和免疫逃逸过程中起着重要作用［1］。头颈部恶性肿瘤的研究也证实其微环境可严重损害多种免疫细胞，钮括NK细胞、单核细胞和T淋巴细胞。转录因子Foxp3,是目前公认的Treg的特异性分子标志，其基因表达产物可控制CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的生长、分化和成熟［2］。通过Tre

4、g细胞对抗肿瘤细胞免疫的免疫抑制，Foxp3在肿瘤的发牛.、发展中起到重要作用。喉癌是常见的头颈部恶性肿瘤之一，木研究采用免疫组化方法检测Foxp3+Treg在喉癌组织中的表达水平及其与患者临床病理特征的关系，探讨Foxp3在喉癌发生、发展中的作用。1材料和方法1.1患者和样本采集36例标本取自福建省立医院耳鼻喉科2008.8-2010.12月行手术切除喉癌患者，其中34例，女2例；年龄45〜79岁，平均年龄64岁；肿瘤组织高分化16例，中分化11例，低分化9例；T1〜T2期21例，T3〜T4期15例

5、；有颈部淋巴结转移11例，无淋巴结转移25例。15例对照来源于喉癌患者正常的喉部组织。所有病例均未行放、化疗和生物免疫治疗，均为首次手术，所有标本经病理学诊断证实。标本经福尔马林固定，石蜡包埋，4μm厚连续切片，常规H-E染色和免疫组织化学染色。1.2检测方法1.2.1免疫组织化学染色鼠抗人Foxp3单克隆抗体（Abeam公司）；即用型免疫组化超敏SP试剂盒、DAB显色试剂盒均为福州迈新生物技术公司产品。常规SP法，每次染色设置阳性（喉癌组织）和阴性对照（PBS代替一抗）。结果判定，阳性细胞形态

6、完整，结构清晰，棕黄色颗粒特异性定位于细胞核。1.2.2免疫组织化学结果观察采用双盲法进行观察，随机对每张切片选择5个高倍视野（400×）计数阳性细胞数，求其平均值。1.3统计学方法数据以x-&plUsmn;S表示，采用SPSS13.0统计软件进行统计学分析，数据进行t检验和Spearman等级相关分析，以P<0.05为差异显著，有统计学意义；P<0.01为差异非常显著，有统计学意义。2结果（见图）2.1喉癌组织高表达Foxp3+TregFoxp3+Treg细胞形态完整，结构明晰,DAB显

7、色细胞核棕黄色染色,散在分布于肿瘤组织中。肿瘤组织中阳性细胞的平均浸润数目（31.40±10.89）高于正常组织（2.70±2.35）P<0.01,差异有统计学意义。2.2喉癌组织Foxp3+Treg表达与临床病理特征关系对喉癌组织Foxp3+Treg分布与艽临床病理特征进行分析，结果显示：低分化组Foxp3+Treg细胞数(47.89±5.58)显著高于中分化组(26.72±4.34)和高分化组(25.43±5.56),P<0.0

8、1；中分化组稍高于高分化组，但无统计学差异(图1、2、3)。Spearman等级相关分析显示Foxp3+Treg细胞数与肿瘤细胞分化等级间存在相关(相关系数0.65，P=0.000)。冇颈部淋巴结转移者Foxp3+Treg细胞数(40.4±14.2)高于无颈淋巴结转移者(27.50±5.98),P<0.05。患者的年龄、病史、肿瘤的原发部位及肿瘤大小(T)与Foxp3+Treg细胞数之间的相关性研究未发现统计学意义(表1)。表