抗ⅱ型胶原抗体的检测及其在类风湿关节炎中的意义

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1、抗Ⅱ型胶原抗体的检测及其在类风湿关节炎中的意义摘　要】　目的　了解抗Ⅱ型胶原抗体在类风湿关节炎(RA)中的临床意义。方法　以改进的酶联免疫吸附法(ELISA)检测179例RA患者和171例其他风湿病患者的血清IgG型抗天然及抗变性Ⅱ型胶原抗体水平。结果　RA患者抗天然和抗变性Ⅱ型胶原抗体阳性率各为22.3%和36.9%，早期RA患者各为30.0%和36.7%。其他风湿病患者中各为3.5%和31.6%，健康人二者均为2.5%。抗天然Ⅱ型胶原抗体阳性RA患者类风湿因子检出率、患者对病情活动性评价高于阴性组(P0.05)。抗变性Ⅱ型胶原抗体和抗天然Ⅱ型胶原抗体同时

2、阳性RA患者的CRP平均水平较高。结论　抗天然Ⅱ型胶原抗体可以作为RA的一个辅助诊断指标。抗天然与抗变性Ⅱ型胶原抗体的检测有助于判断RA病情活动性。　　Anti-typeⅡcollagenantibodiesinrheumatoidarthritis　　【Abstract】　Objective　Toinvestigatetheclinicalsignificanceofanti-type-Ⅱ-collagensantibodyinrheumatoidarthritis(RA).Method　SerumIgGantibodiestonativeanddenat

3、uredtypeⅡcollagens(anti-ncⅡandanti-dcⅡ)provedenzymelinkedimmunosorbentassay(ELISA),andtheirclinicalsignificanceaterials.Results　InRA,thepositiveratesofanti-ncⅡandanti-dcⅡaticdiseasesthepositiveratesentofdiseaseactivity(P0.05).Thepresenceofanti-ncⅡandanti-dcⅡconitantlyentalparameter

4、indiagnosingRAandtogetherayhelpevaluatethediseaseactivity.　　【Keyatoidarthritis;　Anti-typeⅡcollagenantibody;　Enzyme-linkedimmunosorbentassay;　C-reactiveprotein　　抗Ⅱ型胶原抗体(antibodiestotypeⅡcollagen)与类风湿关节炎(RA)病情活动性、严重性的关系目前仍有争论。本研究参照Fujii等［1］提出的实验条件检测179例RA患者、171例其他风湿病和118名正常人血清的抗Ⅱ型胶原抗

5、体，探讨其在RA中的临床意义。结果报告如下。　　1　资料与方法　　1.1　一般资料　　1.1.1　病人组：为1994年9月至1999年3月在汕头大学医学院第一附属医院风湿科住院、门诊、随访的RA患者，共179例，全部符合1987年美国风湿病协会(ARA)的RA分类标准［2］。其中男性53例，女性126例，年龄17～76岁，平均46.3岁。其中病程1年之内，X线未出现明显骨质破坏者(以下简称早期病例)30例。　　1.1.2　对照组：共289例，分为两组：一组为同期在汕头大学医学院第一附属医院风湿科门诊或住院的非RA的其他风湿性疾病患者171例；另一组为正常对照

6、组，共118名。　　1.2　抗Ⅱ型胶原抗体的体测　　参照Fujii等［1］的方法。　　1.2.1　微量反应板的包被及封闭：正常羊血清于62℃加热20min，加入固体Tris(0.05mol/L)、NaCl(0.15mol/L)和2mol/LHCl，调pH值至8备用(BNGS)。天然Ⅱ型胶原在46℃水浴中加热20min，即为变性胶原。　　将天然Ⅱ型和变性Ⅱ型胶原分别溶解于0.05mol/L的醋酸中，浓度为3mg/ml。0.02mol/L磷酸缓冲液(PB)pH7.6稀释胶原溶液，使浓度为40μg/ml，加入微量反应板孔，每孔100μl，保鲜膜覆盖，4℃过夜。　　

7、在与待检血清标本进行温育之前，包被好的微量反应板用含0.05%吐温－20的生理盐水溶液洗涤3次，然后每孔加入100μlBNGS，室温(24～28℃)下封闭30min，洗涤液洗涤3次。　　1.2.2　检测：BNGS稀释待检及阳性对照、阴性对照血清，转入微量反应板的微孔中，设二孔平行，每孔100μl，同时设空白对照。室温温育2h，生理盐水-吐温溶液洗涤3次。含25%BNGS的0.1mol/LTBSpH8.0溶液稀释辣根过氧化物酶标记的羊抗人IgG，每反应孔加入100μl，室温温育2h，洗涤。将联苯二胺和过氧化氢溶解于柠檬酸-磷酸缓冲液pH5.0中，使各自浓度分别

8、为0.05%和0.017%，加入反应孔，每孔100μ