抗ⅱ型胶原抗体的检测及其在类风湿关节炎中的意义论文

《抗ⅱ型胶原抗体的检测及其在类风湿关节炎中的意义论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、抗Ⅱ型胶原抗体的检测及其在类风湿关节炎中的意义论文【摘要】目的了解抗Ⅱ型胶原抗体在类风湿关节炎(RA)中的临床意义。方法以改进的酶联免疫吸附法(ELISA)检测179例RA患者和171例其他风湿病患者的血清IgG型抗天然及抗变性Ⅱ型胶原抗体水平。结果RA患者抗天然和抗变性Ⅱ型胶原抗体阳性率各为22.3%和36.9%，早期RA患者各为30.0%和36.7%。其他风湿病患者中各为3.5%和31.6%，健康人二者均为2.5%。抗天然Ⅱ型胶原抗体阳性RA患者类风湿因子检出率、患者对病情活动性评价高于阴性组(P0.05)。抗

2、变性Ⅱ型胶原抗体和抗天然Ⅱ型胶原抗体同时阳性RA患者的CRP平均水平较高。结论抗天然Ⅱ型胶原抗体可以作为RA的一个辅助诊断指标。抗天然与抗变性Ⅱ型胶原抗体的检测有助于判断RA病情活动性。Anti-typeⅡcollagenantibodiesinrheumatoidarthritis【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheclinicalsignificanceofanti-type-Ⅱ-collagensantibodyinrheumatoidarthritis(RA).Method

3、SerumIgGantibodiestonativeanddenaturedtypeⅡcollagens(anti-ncⅡandanti-dcⅡ)provedenzymelinkedimmunosorbentassay(ELISA),andtheirclinicalsignificanceaterials.ResultsInRA,thepositiveratesofanti-ncⅡandanti-dcⅡaticdiseasesthepositiveratesentofdiseaseactivity(P0.05).T

4、hepresenceofanti-ncⅡandanti-dcⅡconitantlyentalparameterindiagnosingRAandtogetherayhelpevaluatethediseaseactivity.【Keyatoidarthritis;Anti-typeⅡcollagenantibody;Enzyme-linkedimmunosorbentassay;C-reactiveprotein抗Ⅱ型胶原抗体(antibodiestotypeⅡcollagen)与类风湿关节炎(RA)病情活动性、严

5、重性的关系目前仍有争论。本研究参照Fujii等［1］提出的实验条件检测179例RA患者、171例其他风湿病和118名正常人血清的抗Ⅱ型胶原抗体，探讨其在RA中的临床意义。结果报告如下。1资料与方法1.1一般资料1.1.1病人组：为1994年9月至1999年3月在汕头大学医学院第一附属医院风湿科住院、门诊、随访的RA患者，共179例，全部符合1987年美国风湿病协会(ARA)的RA分类标准［2］。其中男性53例，女性126例，年龄17～76岁.freelin，加入固体Tris(0.05mol/L)、NaCl(0.15

6、mol/L)和2mol/LHCl，调pH值至8备用(BNGS)。天然Ⅱ型胶原在46℃水浴中加热20min，即为变性胶原。将天然Ⅱ型和变性Ⅱ型胶原分别溶解于0.05mol/L的醋酸中，浓度为3mg/ml。0.02mol/L磷酸缓冲液(PB)pH7.6稀释胶原溶液，使浓度为40μg/ml，加入微量反应板孔，每孔100μl，保鲜膜覆盖，4℃过夜。在与待检血清标本进行温育之前，包被好的微量反应板用含0.05%吐温－20的生理盐水溶液洗涤3次，然后每孔加入100μlBNGS，室温(24～28℃)下封闭30min，洗涤液洗涤3

7、次。1.2.2检测：BNGS稀释待检及阳性对照、阴性对照血清，转入微量反应板的微孔中，设二孔平行，每孔100μl，同时设空白对照。室温温育2h，生理盐水-吐温溶液洗涤3次。含25%BNGS的0.1mol/LTBSpH8.0溶液稀释辣根过氧化物酶标记的羊抗人IgG，每反应孔加入100μl，室温温育2h，洗涤。将联苯二胺和过氧化氢溶解于柠檬酸-磷酸缓冲液pH5.0中，使各自浓度分别为0.05%和0.017%，加入反应孔，每孔100μl，37℃温育30min后每孔加入终止液1.25mol/L硫酸50μl终止反应，酶标分光

8、光度计492nm处测吸光度(A)值。1.2.3结果判断：以正常血清的平均A值加3个标准差作为正常值上限，待检血清A值超过者即被认为是阳性。1.3统计学处理计量资料数据采用t检验，计数资料数据采用χ2检验。2结果2.1ELISA工作浓度的选择：为便于比较，选择工作浓度时以天然Ⅱ型胶原作为包被抗原，测定血清抗天然Ⅱ型胶原抗体水平。参照文献［3］的方法进行。结果表