抗RA33抗体的检测及其在类风湿关节炎中的意义

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1、抗RA33抗体的检测及其在类风湿关节炎中的意义抗RA33抗体的检测及其在类风湿关节炎中的意义2010-01-13刘建平曾庆馀周修国肖征宇许杰洲黄少弼为了解抗RA33抗体在类风湿关节炎(RA)诊断、早期诊断和预后估计的意义，为治疗个体化提供线索〔1〕，我们用Hassfeld等的方法对RA等280例进行检测，结果如下。1资料与方法1.1研究对象病人组：RA患者125例，男42例，女83例，年龄18岁〜76岁，平均46.1岁。其屮早期37例。未使用过慢作用抗风湿药或使用时间短于1个月者(下简称未用药者)66例。诊断均符合1987年美国风湿病

2、学会(ARA)RA分类标准。对照组：共155例，其中各种风湿病111例，包括系统性红斑狼疮(SLE)54例、强直性脊柱炎(AS)47例、系统性硬化症(SSc)10例,诊断均符合相应的国际通用诊断标准；另44例为正常对照组。1.2方法1.2.1收集血清标本，记录患者同期一般情况、关节表现(压痛关节数、肿胀关节数、关节指数)、病情严重性(Strinbrocker分期分级)、关节外表现、医师和病人对病情活动性的评价等。关节表现采用28个关节计分法(2),手足关节X线病情进展采用改进Sharp评分标准评价。1.2.2培养收集约2X109个He

3、La细胞，按Hassfeld等方法提取RA33抗原，经12%十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)凝胶电泳分离，再电泳转移至硝酸纤维膜，封闭非特异位点后，与病人血清进行免疫印迹反应。病人血清1:20稀释，标记抗体为1：200稀释的辣根过氧化物酶标记的羊抗人IgG抗体，用标准分子量标记物半对数作图法，判定检测标本的结果。1.2.3其它血清学指标包括抗鼠食管角质层抗体(AKA)、血沉(ESR)、C-反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)、抗核抗体(ANA)等。2结果125例RA病人中，42例为抗RA33阳性，抗RA33对RA诊断敏

4、感性为33.6%,特异性为96.2%；未用药者抗RA33阳性率为43.9%(29/66),用药者为15.7%(13/59)(P<0.01)；抗RA33抗体阳性者69%(29/42)病程小于三年；阳性者RF阳性率比阴性者低(54.8%,23/42对81.9%,68/83)(P<0.001)；而AKA阳性率则显著高于阴性组(45%、19/42对3.6%、3/83,PV0.001)。病人年龄、性别、关节表现、实验室指标及关节外表现等，总体上阳性组均较阴性组或轻或低，但差异无统计学意义。在Steionbrocker疾病进展分期和功能分级方面，

5、同期、同级内,阳性组第I期、II期和第1级、2级所占比例高，第III期、IV期和第3级、4级则阴性组比例较高。对104例RA病人X线手足正位相的Sharp评分结果，抗RA33抗体阳性者平均值(36.2±7.5)显著低于阴性者(64.0±7.3)(P<0.001)o37例病情短于1年、骨质无明显破坏的早期RA,抗RA33阳性率为51.4%(19/37),显著高于非早期病例(20.5%,23/88)(PV0.001)。除阳性组AKA阳性率高于阴性组(31.6%.6/19对5.6%、1/18)外，其它实验室各项指标和病情进展分期、功能分级等

6、方面阳性组与阴性组均无显著性差异。本对照组中,10例抗RA33阳性，其中SLE8例(14.8%),SSc2例(2/10),均为女性。抗RA33阳性SLE患者临床检测抗dsDNA抗体、抗Sni抗体、抗RNP抗体以及ANA均为阳性，与RA有明显差别。3讨论抗RA33对RA诊断敏感性国内外结果不一，大多介于20%〜40%之间，最高61%,最低仅为6%。本文结果为33.6%,与北京协和医院报告相近。其特异性最初报道为99.6%〔3)。但后来研究表明在10%~40%的SLE等疾病也可检测到该抗体。由于RA33是异质性核糖核蛋白体(hnRNP)的

7、核心蛋口A2,有人认为SLE等疾病中针对小核糖核蛋口体(snRNP)成分如ul-RNP的自身免疫反应可以针对hnRNP-snRNP复合体中的hnRNP成分如A2产生交叉反应，从而导致这些疾病中抗RA33阳性率高，而RA病人则只针对RA33/A2产生反应。因此，同时检测抗Sm、抗RNP、ANA等抗体，有助于鉴别抗RA33阳性的意义，提高对RA的特杲性，本文结果特杲性为96.2%,对照组阳性者与抗Sm、抗RNP和ANA、抗dsDNA显著相关，支持上述看法。木组RA33阳性病例手、足X线相的病情进展评分显著低于RA33阴性者，病情进展分期分

8、级也较轻，RF阳性率低。这些情况提示抗RA33阳性者病情较轻，但是否提示具有自限性、预后良好，诡待进一步研究。另外，本组未用药RA病人抗RA33阳性率显著高于用药病人，提示慢性作用抗风湿药可能影抗RA33阳性率。Cord