抗ⅱ型胶原抗体的检测及其在类风湿关节炎中的意义

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1、抗Ⅱ型胶原抗体的检测及其在类风湿关节炎中的意义  【摘 要】 目的 了解抗Ⅱ型胶原抗体在类风湿关节炎(RA)中的临床意义。方法 以改进的酶联免疫吸附法(ELISA)检测179例RA患者和171例其他风湿病患者的血清IgG型抗天然及抗变性Ⅱ型胶原抗体水平。结果 RA患者抗天然和抗变性Ⅱ型胶原抗体阳性率各为22.3%和36.9%,早期RA患者各为30.0%和36.7%。其他风湿病患者中各为3.5%和31.6%,健康人二者均为2.5%。抗天然Ⅱ型胶原抗体阳性RA患者类风湿因子检出率、患者对病情活动性评价高于阴性组(P0.05)。抗变性Ⅱ型胶原抗体和抗

2、天然Ⅱ型胶原抗体同时阳性RA患者的CRP平均水平较高。结论 抗天然Ⅱ型胶原抗体可以作为RA的一个辅助诊断指标。抗天然与抗变性Ⅱ型胶原抗体的检测有助于判断RA病情活动性。  Anti-typeⅡcollagenantibodiesinrheumatoidarthritis  【Abstract】 Objective Toinvestigatetheclinicalsignificanceofanti-type-Ⅱ-collagensantibodyinrheumatoidarthritis(RA).Method SerumIgGantibodie

3、stonativeanddenaturedtypeⅡcollagens(anti-ncⅡandanti-dcⅡ)provedenzymelinkedimmunosorbentassay(ELISA),andthEirclinicalsignificanceaterials.Results InRA,thepositiveratesofanti-ncⅡandanti-dcⅡaticdiseasesthepositiveratesentofdiseaseactivity(P0.05).Thepresenceofanti-ncⅡandanti-dcⅡ

4、conitantlyentalparameterindiagnosingRAandtogetherayhelpevaluatethediseaseactivity.  【Keyatoidarthritis; Anti-typeⅡcollagenantibody; Enzyme-linkedimmunosorbentassay; C-reactiveprotEIn  抗Ⅱ型胶原抗体(antibodiestotypeⅡcollagen)与类风湿关节炎(RA)病情活动性、严重性的关系目前仍有争论。本研究参照Fujii等[1]提出的实验条件检测179例

5、RA患者、171例其他风湿病和118名正常人血清的抗Ⅱ型胶原抗体,探讨其在RA中的临床意义。结果报告如下。  1 资料与方法  1.1 一般资料  1.1.1 病人组:为1994年9月至1999年3月在汕头大学医学院第一附属医院风湿科住院、门诊、随访的RA患者,共179例,全部符合1987年美国风湿病协会(ARA)的RA分类标准[2]。其中男性53例,女性126例,年龄17~76岁,平均46.3岁。其中病程1年之内,X线未出现明显骨质破坏者(以下简称早期病例)30例。  1.1.2 对照组:共289例,分为两组:一组为同期在汕头大学医学院第一附

6、属医院风湿科门诊或住院的非RA的其他风湿性疾病患者171例;另一组为正常对照组,共118名。  1.2 抗Ⅱ型胶原抗体的体测  参照Fujii等[1]的方法。  1.2.1 微量反应板的包被及封闭:正常羊血清于62℃加热20min,加入固体Tris(0.05mol/L)、NaCl(0.15mol/L)和2mol/LHCl,调pH值至8备用(BNGS)。天然Ⅱ型胶原在46℃水浴中加热20min,即为变性胶原。  将天然Ⅱ型和变性Ⅱ型胶原分别溶解于0.05mol/L的醋酸中,浓度为3mg/ml。0.02mol/L磷酸缓冲液(PB)pH7.6稀释胶原

7、溶液,使浓度为40μg/ml,加入微量反应板孔,每孔100μl,保鲜膜覆盖,4℃过夜。  在与待检血清标本进行温育之前,包被好的微量反应板用含0.05%吐温-20的生理盐水溶液洗涤3次,然后每孔加入100μlBNGS,室温(24~28℃)下封闭30min,洗涤液洗涤3次。  1.2.2 检测:BNGS稀释待检及阳性对照、阴性对照血清,转入微量反应板的微孔中,设二孔平行,每孔100μl,同时设空白对照。室温温育2h,生理盐水-吐温溶液洗涤3次。含25%BNGS的0.1mol/LTBSpH8.0溶液稀释辣根过氧化物酶标记的羊抗人IgG,每反应孔加入

8、100μl,室温温育2h,洗涤。将联苯二胺和过氧化氢溶解于柠檬酸-磷酸缓冲液pH5.0中,使各自浓度分别为0.05%和0.017%,加入反应孔,每孔1

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