抗Sa抗体的检测及其临床意义

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1、抗Sa抗体的检测及其临床意义关键字:抗Sa抗休1994年加拿大学者Despres等[1]首次报道从人脾脏中提取Sa抗原,应用蛋白质免疫印迹法(Westernblotting)在42.7%类风湿关节炎(RA)患者中检测出抗Sa抗体,特异性高达98.9%;且病程小于1年者的阳性率为29%O本文采用Despres方法从新鲜人胎盘屮提取Sa抗原,检测RA和其他风湿性疾病的抗Sa抗体,了解其临床意义,报道如下。1资料与方法1.1研究对象试验组RA192例,均符合1987年美国风湿病学会(ARA)修订的RA分类标准[2]。男性58例,女性134例,年龄1

2、7〜76岁,平均46.1岁。其中早期RA(病程小于1年,X线无明显骨质侵蚀者)31例。采集血清时记录同期的临床、实验室指标,关节表现采用28关节计分法[3],医师和患者对病情活动性的评估及患者对关节痛的口我评估采用ARA推荐的10cm视力表评定。对照组294例,包括系统性红斑狼疮(SLE)73例,强直性脊柱炎(AS)40例,其他脊柱关节病(SpA)16例,骨性关节炎(0A)27例,痛风(Gout)15例,皮肌炎(DM)8例,其他风湿病62例,以上病例均符合冃前的国际诊断标准;止常人53名。1.2检测方法1.2.1抗原捉取:在4°C下操作。新鲜

3、人胎盘匀浆后离心,取上清,加入阴离了交换剂DE52搅拌,用不同浓度的洗脱液洗脱,行透析及冷冻干燥,一30°C保存。标准抗原Ftl北京协和医院张乃峥教授提供,该抗原与Despres提供的标准抗原相比条带一致。1.2.2SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳:取4mgSa抗原溶于200u1SDS-PAGE样品缓冲液中,在10%分离胶中电泳。将分离的蛋白转移到硝酸纤维膜上,再与待测血清反应,所有待测血清均1:40稀释。然后加入1:500稀释的辣根过氧化物酶标记的羊抗人IgG抗体。加入底物溶液(DAB显色液)反应,待蛋白质条带清晰后加入终止液。以标准分子量标记物

4、半对数作图,相对分子量50000或50000、55000出现印迹条带者为阳性。1.3统计学处理应用SPSS统计软件行t检验、x2检验、方差分析等,取Q=0.05为显著性检验标准。2结果2.1抗Sa抗体对R/诊断的敏感性和特异性:抗Sa抗体对RA诊断的敏感性为33.9%(65/192),特异性为96.9%(SLE8例阳性、DM1例阳性),阳性预报率为87.8%,阴性预报率为69.2%;早期RA中抗Sa抗体阳性率为32.3%(10/31)。9例检测时不能确诊,经随访确诊RA患者屮4例抗Sa抗体阳性。2.2抗Sa抗休单独出现50000条带与同时出

5、现50000、55000两条带的比较:65例抗Sa抗体阳性RA中,同时出现50000、55000两条带者15例,单独出现50000条带者50例。前者在医师对病情活动性的评分、患者对病情活动性的自我评分、患者对关节痛的自我评分、C反应蛋白(CRP)增高等方面较后者明显增高,红细胞沉降率(ESR)、IgG虽无差异,但亦增高。同时出现50000、55000两条带者病情活动性较高。2.3抗Sa抗体与RA临床、实验室指标的关系(表1〜3):抗Sa抗休阳性组以小关节起病为主,类风湿因T(RF)阳性滴度明显较阴性组高,其他临床、实验室指标差异无显著性。63

6、例RF阴性RA中,抗Sa抗体阳性17例,阳性率为27%。按病程分组,病程<1年抗Sa抗体阳性者X线病情分期II级较阴性者多(IILIV级均缺如)o抗Sa抗体阳性组和阴性组RF、抗核周因子(APF)、抗鼠食管角质层抗体(AKA)、抗RA33抗体、抗核抗体(ANA)阳性率比较差异无统计学意义。3讨论1994年Despres等[1]发现抗Sa抗体以来,迄今国内外研究尚不多见。目前仅知Sa抗原为一与核酸无关的非酰基化多肽,相对分子量为50000和55000。Sa抗原存在于人脾脏、胎盘和关节滑膜翳中,可能为人体组织的正常组成成分。后來发现RA患者关节滑

7、液[4]中存在抗Sa抗体,推测其可能在RA发病过程中起潜在作用。抗Sa抗体对RA诊断敏感性最初报道为42.7%,冃前研究在32%〜43%之间[5],本文结果为33.9%,与采用Despres等[1]方法的许尚栋等[6]结果相近,较Despres低。可能为地域、人种的差异或病例的选择不同所致。目前研究结果特异性平均为97%左右,本文为96.9%,与许尚栋、Despres报道相近。抗Sa抗体可出现在RA发病早期,Despres在病程小于1年的RA中抗Sa抗体阳性率为29%;本文早期RA抗Sa抗体阳性率为32.3%;另有9例检测时未能确诊,经随访确

8、诊RA患者4例抗Sa.抗体阳性。抗Sa抗体有助于RA的早期诊断。新鲜人胎盘提取的Sa抗原可同时表现50000>55000两条带,亦可仅表现为50000-条带。有认为

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