灯盏花素对大鼠脑缺血再灌注后脑内fas表达的抑制作用的论文

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1、灯盏花素对大鼠脑缺血再灌注后脑内Fas表达的抑制作用的论文【摘要】目的研究灯盏花素对大鼠脑缺血再灌注引起脑损伤的保护作用，探讨其作用机制。方法选用40只雄性gso4治疗组、灯盏花素治疗组ⅰ和ⅱ（breⅰ、ⅱ组）。结扎中脑动脉，然后再灌注。用tunel法和免疫组化法分别检测脑组织凋亡细胞和fas阳性细胞的变化。结果①降低脑组织凋亡细胞：mgso4组、breⅰ、ⅱ组在脑缺血再灌注23h后海马区凋亡神经元/海马神经元均较ir组海马区凋亡神经元/海马神经元低，差异有显著性。②降低fas阳性表达细胞数量：mgso4组、breⅰ组和

2、breⅱ组在脑缺血再灌注23h后海马区fas表达阳性神经元/海马神经元均较ir组海马区fas表达阳性神经元/海马神经元低，差异有显著性。结论灯盏花素可显著保护大脑缺血再灌注引起的脑损伤,可能与其抑制fas蛋白的表达有关。其作用优于单用mgso4。【关键词】灯盏花素；脑缺血；再灌注；凋亡细胞；fas蛋白　　abstract:objectivetostudytheprotectiveeffectandmechanismofbreviscapineonratcerebraldamageafterischemiareperfu

3、sion.methods40malegroup,irgroup,mgso4treatmentgroup,breviscapinetreatmentgroupⅰandⅱ.thebrainarteryethodandimmunohistochemicalmethodrespectively.results①apoptosisofneuronscellsinbraingso4group,breⅰgroupandbreⅱgroupshopusapoptosisneurons/hippocampalneurons23hrsafte

4、rischemiareperfusion,andbregroupgso4group,thedifferenceberoffaspositivecellsincerebralgso4group,breⅰgroupandbreⅱgrouppusfaspositiveneurons/hippocampalneurons23hrsafterischemiareperfusion,andbregroupgso4groupinapoptosis,thedifferenceischemiareperfusionbraininjur

5、y,ightberelatedtoinhibitionoffasproteinexpression.itseffectgso4.　　keyia;reperfusion;apoptosiscells;fasprotein　　脑血管缺血性疾病是高致残率和高死亡率的疾病，神经保护药物将有助于减轻缺血半暗区的损伤，促进脑功能的恢复。.灯盏花素(breviscapine，bre)是从中药灯盏花中提取的，其有效成份是4’羟基黄芩素7o葡萄糖醛酸苷［1］，具有显著的抗血小板和血栓形成的活性［2,3］。灯盏花素已被用于治疗缺血性脑

6、血管疾病，通过清除自由基和凋亡细胞而保护大脑。在脑缺血前后应用灯盏花素，研究证实其对缺血再灌注(ischemiareperfusion，ir)有保护作用［4,5］，然而，其治疗机制尚不完全清楚。本文进一步研究灯盏花素(bre)对大鼠脑缺血再灌注引起脑损伤的保护作用及其可能机制，观察其保护作用是否比mgso4更有效。　　1材料与方法　　1.1材料　　　　40只gso4(无锡第七制药厂)，用母液治疗，传统常用药物；histostaintmspkits和抗fas蛋白抗体为美国santacruz生物技术产品。　　1.2方法　

7、　1.2.1动物分组　　40只l/kg；②ir组(注射生理盐水20ml/kg)；③breⅰ组(bre50mg/kg)；④breⅱ组(bre75mg/kg)；⑤mgso4组（30mg/kg）。所有药物在缺血10min后静脉给药。实验过程中无死亡和脱失。　　1.2.2中脑动脉结扎(mcao)方法见文献［6］。　　1.2.3原位末端标记（tunel）染色　　用tunel方法检测凋亡细胞的dna片段。在荧光显微镜下计数凋亡细胞,观察缺血再灌注2h，5h,23h脑组织凋亡细胞的变化。　　1.2.4免疫化学染色　　免疫组织化学抗fa

8、s蛋白染色及fas蛋白阳性细胞表达的观察与半定量测定。快速取一部分缺血大脑海马组织，常规经甲醛固定、脱水、包埋、切片(5μm)，免疫组织化学染色采用链霉素亲生物素－过氧化物酶法(sp法)。经梯度脱蜡、抗原修复(胰酶消化)、漂洗、小牛血清封闭非特异抗原、加一抗、漂洗、加二抗、漂洗、3，3’二氨基联苯胺