灯盏花素磷脂复合物对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

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1、灯盏花素磷脂复合物对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用【摘要】目的观察灯盏花素磷脂复合物(BerPC)对脑缺血再灌注大鼠脑损伤的影响。方法复制大鼠大脑中动脉脑缺血再灌注损伤模型，观察缺血后大鼠神经功能障碍情况，测定再灌注后缺血侧脑梗死范围及脑组织中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)的活性及丙二醛（MDA）的含量。结果BerPC剂量依赖性减轻脑缺血再灌注损伤大鼠的神经功能障碍，减少脑梗死面积，拮抗缺血脑组织MDA含量的增加，提高脑组织SOD、GSHPX活性。结论BerPC对脑缺血再灌注损伤大鼠具有明显的保护作用，具有良好的新药开发前景。

2、【关键词】灯盏花素磷脂复合物；脑缺血；再灌注；大鼠　　Abstract:ObjectiveTostudytheprotectiveeffectsofbreviscapinephosphatidylcholineplex(BerPC)againstbraininjuryinratsundergonefocalischemiareperfusion.MethodsCAO)usingintraluminalthread.After2hoursofMCAOreperfusionptomsicbraintissueprovebehaviordisorderinducedb

3、yMCAOandreducebraininfractedareathroughincreasingtheactivityofSODandGSHPX,decreasingthelevelofMDAinbraintissue.ConclusionBerPCcouldprotectagainstfocalbraininjuryinducedbyreperfusioninjuryinmiddlecerebralarteryofratsandcouldbeapromisingproduct.　　Keyia；perfusion;rat　　灯盏花素(Ber)是从菊科植物短葶

4、飞蓬中提取的有效活性成分，是治疗心脑血管疾病的常用天然药物。它能有效清除氧自由基和过多的NO，防止脑缺血造成的细胞膜离子转运紊乱，阻止细胞内钙超载，保护脑细胞，增加脑血流量，改善脑血管循环等［1，2］。但其结构特点决定其口服不易吸收，生物利用度较低［3］。因此笔者将灯盏花素与磷脂(PC)复合，形成灯盏花素磷脂复合物(BerPC)，以提高生物利用度，改善临床疗效。本实验研究BerPC对大鼠脑缺血再灌注(IR)损伤的保护作用，并与Ber进行比较，旨在为新药开发提供药效学依据。　　1材料与方法　　1.1药物与试剂　　Ber（云南植物药厂，批号000908），PC（上

5、海试剂二厂，批号031104）。BerPC由武汉俊民医药研究所提供，批号010311，其制备方法为：取Ber溶于丙酮中，加温至60℃促溶，以质量比1∶1.6比例加入大豆磷脂，搅拌2.5h后，挥除有机溶剂，残余物室温减压干燥10h后得磷脂复合物。三苯基氯化四氮唑(TTC)染液（中国医药集团上海化学试剂公司，批号010411）。考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒（批号030307），超氧化物歧化酶(SOD)测定试剂盒（批号030704），谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)测定试剂盒（批号030715），丙二醛(MDA)测定试剂盒（批号030715）均为南京建成生物工程研究所产

6、品。　　1.2动物　　C（10mL·kg-1）溶液。动物每天灌胃给药1次，连续给药14d。　　2.2大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型的制备［4］　　末次给药后1h，大鼠称重，腹腔注射3%的戊巴比妥钠溶液1mL·kg-1麻醉，仰卧固定于恒温手术台上。颈部皮肤正中切口，分离左侧颈总动脉及其分支。将直径为0.26mm，头端灼烧膨大且光圆的尼龙线经颈总动脉插入颈内动脉入大脑中动脉分支处，进线深度均距颈内、颈外动脉分叉18mm处，阻断左侧大脑中动脉血流2h，拔出尼龙线予以再灌注24h，Sham组仅手术分离，不插尼龙线。　　2.3对大鼠神经功能的影响　　大鼠清醒后，观察其行为学

7、变化，神经症状按　　2.4对大鼠脑梗死面积的影响　　各组大鼠再灌注24h后，开颅取脑，取梗死侧脑组织冰浴上（4℃以下）冠状切成5片，迅速将脑片置于2%TTC染液中，37℃染色20min，10%（φ）甲醛固定。经染色后非缺血区脑组织呈玫瑰红色，梗死区呈白色，将白色组织挖下称重。以梗死区脑质量与总切片脑质量的百分比作为梗死范围。　　2.5对SOD、GSHPX活性及MDA含量的影响　　各组大鼠于再灌注24h后，取缺血侧同一部位脑组织用0.9%冰氯化钠溶液制成10%脑组织匀浆，将匀浆以3000r·min-1离心10min，取上清液，按试剂盒说明书操作，分别测定SOD、G

8、SHPX