灯盏花素对大鼠脑缺血再灌注后脑内fas表达的抑制作用

灯盏花素对大鼠脑缺血再灌注后脑内fas表达的抑制作用

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1、灯盏花素对大鼠脑缺血再灌注后脑内Fas表达的抑制作用【摘要】目的研究灯盏花素对大鼠脑缺血再灌注引起脑损伤的保护作用,探讨其作用机制。方法选用40只雄性gSO4治疗组、灯盏花素治疗组Ⅰ和Ⅱ(BreⅠ、Ⅱ组)。结扎中脑动脉,然后再灌注。用TUNEL法和免疫组化法分别检测脑组织凋亡细胞和Fas阳性细胞的变化。结果①降低脑组织凋亡细胞:MgSO4组、BreⅠ、Ⅱ组在脑缺血再灌注23h后海马区凋亡神经元/海马神经元均较IR组海马区凋亡神经元/海马神经元低,差异有显著性。②降低Fas阳性表达细胞数量:MgSO4组、BreⅠ组和BreⅡ组在脑缺血再灌注23h后海马区Fas表达阳性神经元/海马神经

2、元均较IR组海马区Fas表达阳性神经元/海马神经元低,差异有显著性。结论灯盏花素可显著保护大脑缺血再灌注引起的脑损伤,可能与其抑制Fas蛋白的表达有关。其作用优于单用MgSO4。【关键词】灯盏花素;脑缺血;再灌注;凋亡细胞;Fas蛋白  Abstract:ObjectiveTostudytheprotectiveeffectandmechanismofbreviscapineonratcerebraldamageafterischemiareperfusion.Methods40malegSO4treatmentgroup,breviscapinetreatmentgroupⅠa

3、ndⅡ.Thebrainarteryethodandimmunohistochemicalmethodrespectively.Results①Apoptosisofneuronscellsinbrainpusapoptosisneurons/hippocampalneurons23hrsafterischemiareperfusion,andBregroupberofFaspositivecellsincerebralpusFaspositiveneurons/hippocampalneurons23hrsafterischemiareperfusion,andBregrou

4、pischemiareperfusionbraininjury,ightberelatedtoinhibitionofFasprotEinexpression.Itseffectia;reperfusion;apoptosiscells;FasprotEIn  脑血管缺血性疾病是高致残率和高死亡率的疾病,神经保护药物将有助于减轻缺血半暗区的损伤,促进脑功能的恢复。灯盏花素(breviscapine,Bre)是从中药灯盏花中提取的,其有效成份是4’羟基黄芩素7O葡萄糖醛酸苷[1],具有显著的抗血小板和血栓形成的活性[2,3]。灯盏花素已被用于治疗缺血性脑血管疾病,通过清除自由基

5、和凋亡细胞而保护大脑。在脑缺血前后应用灯盏花素,研究证实其对缺血再灌注(ischemiareperfusion,IR)有保护作用[4,5],然而,其治疗机制尚不完全清楚。本文进一步研究灯盏花素(Bre)对大鼠脑缺血再灌注引起脑损伤的保护作用及其可能机制,观察其保护作用是否比MgSO4更有效。  1材料与方法  1.1材料    40只gSO4(无锡第七制药厂),用母液治疗,传统常用药物;HistostainTMSPKits和抗Fas蛋白抗体为美国SantaCruz生物技术产品。  1.2方法  1.2.1动物分组  40只gSO4组(30mg/kg)。所有药物在缺血10min后

6、静脉给药。实验过程中无死亡和脱失。  1.2.2中脑动脉结扎(MCAO)方法见  2结果  2.1Bre对神经元凋亡的影响    在缺血再灌注后3个不同的时间点,与IR组比较,Bre组和MgSO4组大鼠海马的平均凋亡细胞明显降低。Bre组大鼠海马平均凋亡细胞比IR组和MgSO4组显著地减少,差异有显著性。见表1。表1脑缺血再灌注2h、5h和23h后Bre对大鼠大脑海马神经元凋亡的影响(略)  2.2Bre对Fas表达的影响    IR组、Bre组和MgSO4组Fas蛋白的阳性表达都增加;Bre组Fas蛋白的阳性表达比IR组、MgSO4组显著减少,其差异有显著性。见表2。表2脑

7、缺血再灌注2h、5h和23h后Bre对大鼠大脑海马神经元Fas表达的影响(略)  3讨论    在脑缺血/再灌注损伤后,神经元凋亡显著增加。在脑缺血过程中,缺血半暗带区的多种病理生理过程,包括兴奋性氨基酸毒性、自由基、钙超载、炎症反应及线粒体损伤都可以触发细胞凋亡。脑缺血后细胞凋亡的发生是一个主动过程,它依赖于大分子物质合成,说明细胞凋亡是由基因调控的。其中与MgSO4组、IR组比较:#P<0.01Fas基因被认为是主要的凋亡促进基因[7]。本研究

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