桑色素对小鼠t淋巴细胞体外活化、增殖和细胞周期的影响

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1、桑色素对小鼠T淋巴细胞体外活化、增殖和细胞周期的影响臧宁,曾耀英,黄秀艳,王通,叶雪仪,周建国,王会营【关键词】桑色素;,T细胞活化;,增殖;,细胞周期  Theeffectofmorinonactivation,proliferationandcellcycleofmurineTlymphocytesinvitro  [Abstract]AIM:Todiscovertheeffectsofmorinontheactivation,proliferationandcellcycleofmurineT

2、lymphocytesinvitro.METHODS:MurinelymphnodederivedTlymphocytesulatedentalgroupsorinofdifferentfinalconcentration.Floetry(FCM)ideester(CFDASE)staining]andcellcycle[propidiumiodide(PI)staining]ofTcells.RESULTS:After6htimeofcultureinvitro,therateofCD69+Tce

3、llsincontrolgroupol/L,ol/Lmorin[(48.95±0.81)%(P0.01)].CFDASEstainingshoentalconcentration,ol/Lmorin,pliedthatthepercentageofSphasecellsinConAgroupol/LmoringroupsshoulatedactivationandproliferationofmurineTlymphocytes,inayserveasoneofthemajormechanisms.

4、  [Keyorin;Tcellsactivation;proliferation;cellcycle  [摘要]目的:研究桑色素(morin)对小鼠T淋巴细胞活化、增殖和细胞周期的影响。方法:以刀豆蛋白A(ConA)刺激培养的淋巴结来源的小鼠淋巴细胞,再以不同终浓度的morin与T细胞共培养,利用流式细胞术(FCM),检测早期T细胞活化的标志CD69分子的表达,以羧基荧光素双醋酸盐琥珀酰脂(CFDASE)染色检测T细胞的增殖;以碘化丙锭(PI)染色分析T细胞的细胞周期。结果:小鼠T细胞培养6h后,

5、未经ConA刺激的对照组中CD69+T的细胞比率为(2.97±0.12)%,经ConA刺激的CD69+T细胞的比率明显增高,达到(72.52±0.66)%,与对照组相比差别明显(P0.01)。终浓度为25、50、100μmol/L的morin均下调CD69+T细胞的比率,其中,100μmol/L的morin抑制作用最强,为(48.95±0.81)%,与对照组比较具有统计学意义(P0.01)。CFDASE染色分析显示,ConA组培养48h和72h的T细胞的增殖指数(PI)分别为(1.58±0.04)和

6、(1.95±0.02),各浓度的morin对ConA刺激的T细胞增殖,具有明显地抑制作用,以100μmol/L的morin抑制作用最明显。培养48h的ConA组T细胞的PI为(1.02±0.02)、培养72h的ConA组T细胞的PI为(1.03±0.01),与相应时间的对照组比较,均有统计学意义(P0.01)。PI染色后流式细胞术分析的结果表明,ConA组处于S期的T细胞的比率为(27.05±0.39)%,显著高于对照组的比率(5.10±0.07)%。morin组中S期的细胞比率较高。结论:Mori

7、n可显著抑制ConA刺激的T细胞活化及增殖;其对增殖的抑制作用主要表现为S期的细胞的阻滞。  [关键词]桑色素;T细胞活化;增殖;细胞周期  桑色素(morin)化学名称为(3,5,7,2',4'五羟黄酮),是黄酮类化合物中的一种,为从黄桑木、桑橙树和许多中草药中提取的一种浅黄色色素[1]。morin分子的结构特点是含氧的杂环连接两个芳香族环,具有抗炎[2]、抗肿瘤[3]及抗氧化[4]等作用。Fang等[5]研究表明,morin可抑制Th1细胞产生的IL12和经LPS/IFNγ活化的巨噬细胞产生的N

8、O,提示morin具有抑制固有免疫的作用,然而关于morin使T细胞活化、增殖作用的研究,国际、国内罕见报道。因此,我们先用刀豆蛋白A(ConA)使T细胞活化、增殖后,再以morin进行刺激,探讨其对T细胞活化、增殖的影响,以为其临床应用提供试验依据。  1材料和方法  1.1材料清洁级BALB/c近交系小鼠,雄性,6~8周龄,质量(20±2)g,购自广东省实验动物中心。morin、ConA、碘化丙锭(propidiumiodide,PI)、L谷氨酰胺、β巯基乙醇,均

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