可溶性jagged1-fc嵌合蛋白对小鼠淋巴细胞活化、增殖和周期的影响

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1、可溶性Jagged1/Fc嵌合蛋白对小鼠淋巴细胞活化、增殖和周期的影响:邢飞跃,于哲,刘静,季煜华【摘要】  目的:研究可溶性Jagged1/Fc嵌合蛋白在小鼠淋巴细胞活化、增殖和周期中的作用。方法:选择有效剂量为500μg/LJagged1/Fc嵌合蛋白(Jagged1/Fc),以活体染料/羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯染色,建立在多克隆刺激剂刀豆蛋白A(ConA)或佛波醇酯(PDB)加离子霉素(Ion)刺激下评价淋巴细胞增殖的模型,通过流式细胞术分析Jagged1/Fc对淋巴细胞增殖的作用;采用碘化丙锭染色检测Jagged1

2、/Fc对PDB加Ion刺激的淋巴细胞周期变化的影响;利用荧光标记的mAb双染技术观察Jagged1/Fc对T细胞早期和中期活化标志CD69和CD25表达的影响。结果:Jagged1/Fc对ConA刺激或非刺激的CD3+细胞CD69和CD25的表达无明显影响,对ConA或PDB加Ion刺激或非刺激的淋巴细胞的增殖指数也无明显影响,导致非刺激的淋巴细胞subG0期细胞百分比增高,S期细胞百分比降低,但并不影响PDB加Ion诱导的淋巴细胞各期的变化。结论:这些结果提示500μg/LJagged1/Fc对小鼠淋巴细胞活化和增殖无明显作

3、用,对PDB加Ion刺激的淋巴细胞周期也无明显影响,但能促进未受刺激的淋巴细胞凋亡,使细胞停滞于G0/G1期,阻止其进入S期。【关键词】Jagged1淋巴细胞活化增殖细胞周期  [Abstract]AIM:ToinvestigateeffectofasolubleJagged1/Fcchimeraprotein(Jagged1/Fc)onactivation,proliferationandcellcyclesoflymphocytesinBALB/cmice.METHODS:Amodeltoevaluatethelymphoc

4、yteproliferationstimulatedidylester(CFDASE)labelingtechnique.Underaneffectivedoseof500μg/LofJagged1/Fc,theeffectofitonthelymphocyteproliferationetry.ApropidiumiodidelabelingtechniqueatetheinfluenceofJagged1/Fconthelymphocytecellcyclestimulatedbyphorbol12,13dibut

5、yrate(PDB)plusIonomycin(Ion).ExpressionlevelsofCD69andCD25moleculesonsurfaceofCD3+lymphocytesactivatedonoclonalantibodylabelingtechnique.RESULTS:Jagged1/FchadnoeffectontheexpressionlevelsofCD69andCD25oftheCD3+lymphocytesstimulatedphocytesstimulatedbyConAorPDBplusIon

6、.ItledtotheincreaseofsubG0phasecellproportionandthedecreaseofSphasecellproportionofthelymphocytes,butdidnotinfluencethechangesofthelymphocytecellcycleinducedbyPDBplusIon.CONCLUSION:TheresultssuggestthatJagged1/Fchasnoobviouseffectontheactivationandproliferationofly

7、mphocytesinmice,butmaypromotetheapoptosisofthem,causetheG0/G1phasearrestandblocktheSphaseentry.  [Keyphocyte;activation;proliferation;cellcycle  Jagged1是存在于哺乳动物细胞膜上Notch受体的主要配体之一,为单次跨膜糖蛋白,表达于骨髓、胎儿肝基质和胸腺上皮等多种细胞,参与调控许多组织的生长发育,维持正常造血干细胞的更新和分化。Jagged1在T细胞、抗原提呈细胞(antigenp

8、resentingcells,APC)表面表达丰富,介导树突状细胞(dendriticcells,DC)的成熟和分化[1]。近来发现,Jagged1与相应的Notch受体结合,激活Jagged1Notch信号通路,能够诱导外周T淋巴细胞向2型辅助T细胞(hel

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