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《芹菜素对小鼠t淋巴细胞体外增殖、细胞周期和凋亡的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、芹菜素对小鼠T淋巴细胞体外增殖、细胞周期和凋亡的影响：梁兆端,曾耀英,黄秀艳,贺芳【摘要】 目的:研究芹菜素（AP）对小鼠T细胞体外增殖、细胞周期和凋亡的影响。方法:无菌分离小鼠淋巴结和胸腺细胞,MTT法检测不同浓度（25、50、100、150、200μmol/L）的AP对多克隆刺激剂刀豆蛋白A(ConA)诱导的T细胞增殖的影响,PI染色结合流式细胞术（FCM）分析细胞周期的分布,AnnexinV-FITC/PI双染色结合FCM检测AP对T细胞凋亡的影响,以及AP与地塞米松（DEX）共同作用下T细胞凋亡的变化,并用MTT法
2、检测该药物浓度对T细胞的毒性作用。结果:25～200μmol/LAP对T细胞无药物毒性作用,并明显抑制ConA诱导的T细胞增殖(P<0.01),使细胞周期停滞在G0/G1期,且呈剂量依赖关系;各浓度AP对T细胞凋亡均具有抑制作用,并明显抑制DEX诱导的T细胞凋亡(P<0.01),且呈剂量依赖关系。结论:在一定浓度范围内,AP明显抑制ConA诱导的小鼠T细胞体外增殖,使细胞周期停滞G0/G1期,并明显抑制T细胞凋亡。【关键词】芹菜素T淋巴细胞增殖周期凋亡 ［Abstract］AIM:Tostudytheeffec
3、tofApigenin(AP)ontheproliferation,cellcycleandapoptosisofmouseTcellsinvitro.METHODS:Thelymphocyteslymphnodesandthymusofmice.TheeffectofAPontheproliferationofTinresponsetoConAatdifferentconcentrations(25,50,100,150,200μmol/L)easuredbyPIstainingandFCM.TheeffectofApig
4、eninandApigenineasuredbyAnnexinV-FITC/PIdoublestainingandFCM.TheeffectofdifferentconcentrationsofAPcytotoxicitytoTcellseasuredbyMTT.RESULTS:25-200μmol/LofAPdidn’thavecytotoxicitytoTcells,butithadsomeinhibitoryeffectonTcellsinresponsetoConA(P<0.01),arrestingcellc
5、ycleatG0/G1inadose-dependentmanner.DifferentconcentrationsofAPinhibitedtheapoptosisofTcells,especiallythoseinducedbyDEX(P<0.01).CONCLUSION:APcaninhibittheproliferationofmouseTcellsinresponsetoConA,arrestcellcycleatG0/G1andinhibittheapoptosisofTcells. ［Keyphocyt
6、e;proliferation;cellcycle;apoptosis 芹菜素（Apigenin,AP）,又名4′,5,7-三羟基黄酮,分子式C15H10O5,是一种无诱导突变的黄酮类化合物,也是一种植物雌性激素,广泛存在于绿色植物中［1,2］。AP具有抗增殖、抗炎、抗病毒微生物和清除自由基等功能,同时也是信号通路中几种蛋白激酶的抑制剂,其4′,5,7位置的三个羟基和C2C3双键决定了其独特的生物学特性［3-5］。目前,AP广泛应用于肿瘤研究中,具有抑制多种肿瘤增殖的潜能,但在免疫学方面的研究罕见报道。目前,以淋巴细胞增殖
7、、细胞周期和凋亡为研究靶点,成为筛选和开发新型免疫调节药物的新策略。在当今开发新型化学药物极为困难的情况下,从食物提取物中筛选具有免疫调节作用的药物具有很大的空间。 1材料和方法 1.1材料清洁级BALB/c近交系小鼠(雄性,8~10周龄,质量22～25g;3~4周龄,质量12～16g),购自广东省医学实验动物中心。刀豆蛋白A(ConA)、L-谷氨酰胺、β-二巯基乙醇、二甲基亚砜(DMSO)、碘化丙啶（PI）、地塞米松(DEX)、噻唑蓝(MTT,用PBS配制成5g/L的工作液,-20℃贮存备用)、芹菜素（AP,用DMSO
8、溶解成265mmol/L的储存液,分装,-20℃保存,临用前用含100mL/LDMSO的PBS稀释成10mmol/L的工作液）和RNase均购自美国Sigma公司。青霉素和链霉素购自华北制药公司。RPMI1640和胎牛血清(fetalcalfserum,FCS)购自美国Gibco-BRL公
