脑忆源胶囊中黄酮类物质含量测定

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1、脑忆源胶囊中黄酮类物质含量测定：邓瑞云，陈永刚，周改莲，区计明，林励，成陈波，李明【摘要】　　【目的】建立脑忆源胶囊中总黄酮和淫羊藿苷含量的测定方法。【方法】采用《保健食品检验与评价技术规范》（2003年版）中规定的方法，以芦丁为对照品，采用紫外—可见分光光度法测定总黄酮含量，高效液相色谱（HPLC）法测定胶囊中淫羊藿苷含量，色谱柱:lunaCl8（2）100R（150mm×4.6mm，5μm），流动相：乙腈—水（体积比为30∶70），流速：1.0mL/min，检测波长：270nm。【结果】芦丁在0～24.75μg/mL范围内呈良好的线性关系，r=0.9990，

2、平均加样回收率为102.29％，sR为1.34％（N＝5）；淫羊藿苷含量在6.9×10-2～4.83×10-1μg范围内与峰面积积分值呈良好线性关系，r=0.9999，平均回收率为95.39％，sR为2.5%（N=5）。【结论】本研究所建立的方法能够准确测定脑忆源胶囊中黄酮类成分的含量。【关键词】脑忆源胶囊/化学；总黄酮/分析；淫羊藿苷/分析；色谱法，高压液相；分光光度法，紫外线　　Abstract：ObjectiveToestablishamethodforthedeterminationoftotalflavonoidsandicariineinNaoyiy

3、uanCapsules.MethodsATOGRAPHY，HIGHPRESSURELIQUID；　　脑忆源胶囊是由补肾中药巴戟天、淫羊藿为主，辅以枸杞子、山药组成的保健食品，用于辅助改善记忆、缓解体力疲劳等症状。现代研究已证实该方中单味药材含有丰富的黄酮类和糖类物质［1］，具有增加脑血流量，促进造血功能、免疫功能及骨代谢，抗衰老等功效［2］，可用于改善记忆力、缓解体力疲劳及抗衰老等［3-4］。由于糖类物质无紫外吸收［5］，故本实验选择总黄酮和淫羊藿苷作为脑忆源胶囊的测定指标，建立其含量测定方法。现报道如下。　　1仪器与试药　　8453E型紫外可见分光光度计（美国

4、Agilent公司），天美液相色谱仪（LC2030型紫外检测器、L2200型进样器、LC2130型泵），ELO2116729型紫外分光光度计，BS110S电子天平（Sartorius公司）。脑忆源胶囊样品为自制（批号：20080624、20080819、20080916），芦丁对照品（购自中国药品生物制品检定所，批号：100080200306），淫羊藿苷对照品（购自中国药品生物制品检定所，供含量测定用，批号：0737200111），聚酰胺粉（柱层析用，60~80目，浙江台州市路桥四甲生化塑料厂），乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水，甲醇、乙醇、苯均为分析纯。　　2

5、方法与结果　　2.1总黄酮的含量测定　　2.1.1溶液的制备［6］　　2.1.1.1芦丁对照品溶液的配制称取5.0mg芦丁，加甲醇溶解制成50μg/mL的芦丁溶液。　　2.1.1.2供试品溶液的制备取脑忆源胶囊3粒（批号：20080819，平均装量0.45g/粒），精密称取内容物粉末1.0g，加乙醇定容至25mL，摇匀后，超声（500in；放置，吸取上清液1.0mL，于蒸发皿中，加1g聚酰胺粉吸附，水浴上挥去乙醇，然后转入层析柱；先用20mL苯洗，苯液弃去，然后用甲醇洗脱黄酮，收集洗脱液约80mL，水浴浓缩，定容至25mL；此液于波长360nm处测定吸收值，代入

6、回归方程，计算试样中总黄酮含量。　　2.1.2标准曲线的制备吸取芦丁标准溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL于10mL比色管中，加甲醇至刻度，摇匀，于波长360nm处比色。以对照品溶液浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线，得直线回归方程为Y=0.0273X-0.0102，R=0.9990，线性范围为0～24.75μg/mL。　　2.1.3精密度试验取芦丁对照品溶液（14.85μg/mL），连续测定5次，结果其吸光度值的sR为0.46%，表明精密度良好。　　2.1.4重复性试验精密称取供试品1.0g（批号:20080819），平行5份，制备供

7、试品溶液，按2.1.2项下方法测定其吸光度值，结果其吸光度值的sR为0.29%，表明该方法的重复性较好。　　2.1.5稳定性试验取同一供试品溶液（批号:20080819），分别在0、15、30、45、60min时测其吸收度，结果其sR为0.05%，说明供试品溶液在60min内稳定。　　2.1.6加样回收率试验精密称取已测含量的胶囊内容物（批号:20080819），加入芦丁对照品，按2.1.1.2项下制备方法进行试验，其平均回收率为102.29%，sR为1.34%，结果见表1。表1加样回收率试验（略）　　2.1.7供试品溶液的测定取3批脑忆源胶囊内容物1.0g，精

8、密称定，按2.1.1.2