姜黄素对肿瘤坏死因子诱导单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

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1、姜黄素对肿瘤坏死因子诱导单核细胞趋化蛋白?1表达的影响【摘要】目的:观察姜黄素对肿瘤坏死因子?α（TNF?α）引起的血管内皮细胞分泌单核细胞趋化因子?1(MCP?1)的影响.方法：采用原代培养方法获得人脐静脉内皮细胞（HUVEC），随机分为对照组、TNF?α刺激组和TNF?α＋姜黄素组.先用TNF?α刺激血管内皮细胞0.5h，再加入不同浓度的姜黄素(6.25,12.5,25,50和100mg/L)共同孵育1h与单纯TNF?α刺激作对照，采用MTT法、ELISA法和RT?PCR法检测姜黄素对细胞及其上清液中MCP?1蛋白表达的影响.结果:H

2、UVEC经TNF?α刺激0.5h后，其MCP?1表达为159.37±4.47，与对照组94.13±6.07相比明显增强（P<0.01）；再与不同浓度姜黄素共同孵育1h后，MCP?1在细胞中的表达分别为：137.63±4.50,121.72±1.96,116.08±3.93和101.62±4.12，与单纯给予TNF?α刺激相比明显减弱（P<0.01），且随着浓度升高有递增的趋势.结论:姜黄素通过抑制炎症因子MCP?1的表达调节血管内皮细胞的炎症反应，从而发挥保护血管内皮细胞，防止动脉粥样硬化的作用.【关键词】姜黄素；单核细胞趋化

3、因子；脐静脉；内皮细胞；肿瘤坏死因子　　【Abstract】AIM:Toobservetheinfluenceofcurcuminontumornecorsisfactor(TNF?α)?inducedexpressionofmonocytechemotacticprotein?1(MCP?1)inhumanumbilicalveinendothelialcells(HUVEC).METHODS:Humanumbilicalveinendothelialcells(HUVEC)algroup,TNF?αstimulationgroupan

4、dTNF?αandcurcuminassociatedstimulationgroup.HUVECulatedinfor1h(TNF?αandcurcuminassociatedstimulationgroup),ulationgroupintheexpressionsofMCP?1.TheinteractionbetinandHUVECatedbyMTTmethod,ELISAandRT?PCR.RESULTS:TheexpressionofMCP?1ulatedbyTNF?αfor0.5h(159.37±4.47,P<0.01)

5、.paredulationgroup,theexpressionsofMCP?1incurcuminandTNF?αassociatedstimulationgroupincanmodulateendothelialinflammatoryresponsethroughinhibitingtheexpressionofinflammatoryfactorMCP?1,andcur?cuminhasprotectiveactionsagainsttheinjuriesofendothelialcellsandprogressionofathe

6、rosclerosis.　　【Keyin;monocytechemotacticprotein?1;umbilicalveins;endothelialcell;tumornecrosisfactor　　0引言　　研究表明，单核细胞的趋化主要由单核细胞趋化蛋白?1（MCP?1）来实现,多种物质及细胞因子都可以诱导MCP?1的表达［1］.肿瘤坏死因子?α通过诱导内皮细胞而产生MCP?1,吸引单核细胞迁入动脉内膜而参与动脉粥样硬化的发生和发展.中药姜黄的有效成分姜黄素具有抗炎、抗动脉粥样硬化的作用，但目前的研究主要围绕其对脂质过氧化的抑制及对

7、细胞间黏附分子?1、血管细胞黏附分子?1和P?选择素等炎性因子的表达的抑制作用等方面［2-3］,而对血管内皮细胞中MCP?1表达影响的研究尚少见报道.本实验通过在离体状态下以肿瘤坏死因子?α为诱导因子，观察姜黄素对MCP?1的影响，旨在进一步阐明其保护内皮细胞，抗动脉粥样硬化的作用机制.　　1材料和方法　　1.1材料新生儿脐带由第四军医大学唐都医院妇产科提供；倒置显微镜（日本Olympas公司）；M199培养基、胰蛋白酶和Ⅰ型胶原酶（美国Gibco公司）；胎牛血清（杭州四季青生物公司）；姜黄素，TNF?α（美国Sigma公司）；噻唑蓝（北

8、京华美公司）；兔抗人MCP?1mAb，ELISA试剂盒（北京中山试剂公司）；Ⅷ因子多克隆抗体（武汉博士德公司）；RT?PCR试剂盒（大连宝生物有限公司）；PCR所用引物由上海生工公司合成.