Toll样受体介导H37Rv诱导的单核细胞趋化蛋白-1表达

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1、H37Rv感染上调小鼠肺泡巨噬细胞T0ll样受体介导H37Rv诱导的单核细胞趋化蛋白-1表达表达李敏超，杜先智，周向东(400010重庆，重庆医科大学附属第二医院呼吸内科)【摘要】目的探讨Toll样受体2（TLR2）、TLR4介导的免疫调节信号通路在结核分枝杆菌感染诱导的单核细胞趋化蛋白-1（Monocytechemoattractantprotein-1，MCP-1）产生中所起的作用。与文题不一致？方法建立人型结核分枝杆菌H37Rv感染小鼠模型，获取模型组及对照组小鼠支气管肺泡灌洗液（Bronchoalveolarlavagefluid,BA

2、LF）及肺泡巨噬细胞(Alveolarmacrophage,AM)，对BALF中AM进行计数，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定BALF中MCP-1水平，Western免疫蛋白印迹（westernblot）方法检测肺组织中MCP-1蛋白含量，逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）测定模型组及对照组AM中TLR2、TLR4mRNA的表达；抗体干预组的AM用TLR2、TLR4抗体预处理并与H37Rv菌株共培养，并设未予以抗体预处理的PBS组及未作任何处理的对照组，分别用ELISA、westernblot法检测AM培养液中及AM中的MCP-1水平，

3、以观察TLR2、TLR4在H37Rv诱导MCP-1生成所起的作用。结果模型组BALF中AM计数及MCP-1蛋白含量显著高于对照组（P<0.05,P<0.05）；模型组小鼠肺组织中MCP-1蛋白含量显著高于对照组（P<0.05）；模型组AM内TLR2、TLR4mRNA表达显著高于对照组（P<0.05,P<0.05）；模型组BALF中MCP-1水平与AM数目呈正相关（r=0.92,P<0.05），并分别与TLR2、TLR4mRNA表达呈正相关（r=0.88,P<0.05；r=0.82，P<0.05）。PBS组AM及其培养上清液中MCP-1蛋白水平显

4、著高于对照组（P<0.05,P<0.05）；TLR2、TLR4抗体干预组AM及其培养上清液中MCP-1蛋白水平均显著低于PBS组（P值均<0.05）；结论在结核宿主免疫中，MCP-1参与诱导单核细胞聚集到感染部位这一过程，MCP-1的水平与AM膜上的TLR2、TLR4受体通道活性有关介导了人型结核分枝杆菌H37Rv所诱导的MCP-1表达。与文题、目的不呼应？【关键词】结核；肺泡巨噬细胞；T0ll样受体；MCP-1【中图法分类号】【文献标识码】A【基金项目】国家自然科学基金资助项目（30872261），重庆市卫生局基金资助课题（2007）【通信作

5、者】周向东，电话:（023）63693093，E-mail:zxd999@263.netToll-likereceptormediatedtheexpressionofMCP-1inducedbyH37RvH37Rvupregulatedtheexpressionoftoll-likereceptoronalveolarmacrophageofmouseLiMinchao,DuXianzhi，ZhouXiangdong(DepartmentofRespiratoryMedicine,theSecondAffiliatedHospital,Cho

6、ngqingMedicalUniversity,Chongqing400010,China)Abstract:ObjectiveToexploretheroleofTLR2,TLR4-mediatedimmuneregulatingsignalpathwayontheproductionofMCP-1inducedbyinfectionofmycobacteriumtuberculosis.MethodsModelofH37RvinfectedmousewasmadebyinjectionH37Rvthroughtailvein.AMsandB

7、ALFwereobtainedfromH37Rvgroupandcontrolgroup.ThenumbersofAMinBALFwerecounted.MCP-1proteinlevelsinBALFandlungtissueweredeterminedbysandwichELISAandwesternblotrespectively.TheexpressionofTLR2、TLR4mRNAinAMswereexaminedbyRT-PCR.ToinvestigatetheroleofTLR2andTLR4ontheexpressionofM

8、CP-1inducedbyH37Rv,theAMsofantibodyinterventiongroupwerepretreatedwithTLR2-