姜黄素对肿瘤坏死因子诱导单核细胞趋化蛋白1表达

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1、姜黄素对肿瘤坏死因子诱导单核细胞趋化蛋白1表达【摘要】目的:观察姜黄素对肿瘤坏死因子α（TNFα）引起的血管内皮细胞分泌单核细胞趋化因子1(MCP1)的影响.方法：采用原代培养方法获得人脐静脉内皮细胞（HUVEC），随机分为对照组、TNFα刺激组和TNFα＋姜黄素组.先用TNFα刺激血管内皮细胞0.5h，再加入不同浓度的姜黄素(6.25,12.5,25,50和100mg/L)共同孵育1h与单纯TNFα刺激作对照，采用MTT法、ELISA法和RTPCR法检测姜黄素对细胞及其上清液中MCP

2、1蛋白表达的影响.结果:HUVEC经TNFα刺激0.5h后，其MCP1表达为159.37±4.47，与对照组94.13±6.07相比明显增强（P<0.01）；再与不同浓度姜黄素共同孵育1h后，MCP1在细胞中的表达分别为：137.63±4.50,121.72±1.96,116.08±3.93和101.62±4.12，与单纯给予TNFα刺激相比明显减弱（P<0.01），且随着浓度升高有递增的趋势.结论:姜黄素通过抑制炎症因子MCP1的表达调节血管内皮细胞的炎症反应，从而发挥保护血管内

3、皮细胞，防止动脉粥样硬化的作用.【关键词】姜黄素；单核细胞趋化因子；脐静脉；内皮细胞；肿瘤坏死因子　　【Abstract】AIM:Toobservetheinfluenceofcurcuminontumornecorsisfactor(TNFα)inducedexpressionofmonocytechemotacticprotein1(MCP1)inhumanumbilicalveinendothelialcells(HUVEC).METHODS:Humanumbilicalveinendoth

4、elialcells(HUVEC)algroup,TNFαstimulationgroupandTNFαandcurcuminassociatedstimulationgroup.HUVECulatedinfor1h(TNFαandcurcuminassociatedstimulationgroup),ulationgroupintheexpressionsofMCP1.TheinteractionbetinandHUVECatedbyMTTmethod,ELISAandRTPCR.RESULT

5、S:TheexpressionofMCP1ulatedbyTNFαfor0.5h(159.37±4.47,P<0.01).paredulationgroup,theexpressionsofMCP1incurcuminandTNFαassociatedstimulationgroupincanmodulateendothelialinflammatoryresponsethroughinhibitingtheexpressionofinflammatoryfactorMCP1,andcur

6、cuminhasprotectiveactionsagainsttheinjuriesofendothelialcellsandprogressionofatherosclerosis.　　【Keyin;monocytechemotacticprotein1;umbilicalveins;endothelialcell;tumornecrosisfactor　　0引言　　研究表明，单核细胞的趋化主要由单核细胞趋化蛋白1（MCP1）来实现,多种物质及细胞因子都可以诱导MCP1的表达［1］.肿瘤坏死

7、因子α通过诱导内皮细胞而产生MCP1,吸引单核细胞迁入动脉内膜而参与动脉粥样硬化的发生和发展.中药姜黄的有效成分姜黄素具有抗炎、抗动脉粥样硬化的作用，但目前的研究主要围绕其对脂质过氧化的抑制及对细胞间黏附分子1、血管细胞黏附分子1和P选择素等炎性因子的表达的抑制作用等方面［2-3］,而对血管内皮细胞中MCP1表达影响的研究尚少见报道.本实验通过在离体状态下以肿瘤坏死因子α为诱导因子，观察姜黄素对MCP1的影响，旨在进一步阐明其保护内皮细胞，抗动脉粥样硬化的作用机制.　　1材料和方法　　1.

8、1材料新生儿脐带由第四军医大学唐都医院妇产科提供；倒置显微镜（日本Olympas公司）；M199培养基、胰蛋白酶和Ⅰ型胶原酶（美国Gibco公司）；胎牛血清（杭州四季青生物公司）；姜黄素，TNFα（美国Sigma公司）；噻唑蓝（北京华美公司）；兔抗人MCP1mAb，ELISA试剂盒（北京中山试剂公司）；Ⅷ因子多克隆抗体（武汉博士德公司）；RTPCR试剂盒（大连宝生物有限公司）；PCR所用引物由上海生工公司合成.　　1.2