三七总甙对氧化低密度脂蛋白诱导系膜细胞tgf-β1与单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

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1、三七总甙对氧化低密度脂蛋白诱导系膜细胞TGF-β1与单核细胞趋化蛋白-1表达的影响【摘要】目的探讨三七总甙(PNS)对氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)诱导大鼠肾小球系膜细胞表达转化生长因子-β1(TGF-β1)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及核转录因子-κB(NF-κB)活性的影响。方法体外培养大鼠肾小球系膜细胞,随机分为对照组、诱导组(OX-LDL50μg/mL)和PNS200,400,800μg/mL组。半定量RT-PCR检测TGF-β1与MCP-1的mRNA表达,ELISA检测TGF-β1与MCP-1蛋白含量,免疫细胞

2、化学观察NF-κBp65核转位。结果OX-LDL诱导系膜细胞TGF-β1与MCP-1表达增强,NF-κB活化,p65核转位率增加。PNS干预后,TGF-β1与MCP-1表达及NF-κBp65核转位率较诱导组明显下降。结论PNS抑制OX-LDL诱导的系膜细胞TGF-β1与MCP-1表达;其机制可能与影响NF-κB核转位有关。【关键词】三七皂甙;脂蛋白类,LDL;肾小球膜;细胞,培养的;NF-κB;转化核因子β;单核细胞化学吸引蛋白质1ABSTRACT:ObjectiveToexploretheeffectofpanaxnotogin

3、seng(PNS)onexpressionsoftransforminggrowthfactorbeta(TGF-β1)andMCP-1andtheactivityofNF-κBinratmesangialcellsinducedbyOX-LDL.MethodsAratglomerularmesangialcell(MC)lineculturedinvitrowasstimulatedby13OX-LDL(50μg/mL)andthentreatedwithPNS(200~800μg/mL).RT-PCRwasusedtodete

4、cttheexpressionsofTGF-β1andMCP-1mRNA.ELISAwasusedtodeterminethelevelsofTGF-β1andMCP-1proteininthesupernatant.AndthetranslocationofNF-κBp65wasobservedbyimmunocytochemistry.ResultsOX-LDLsignificantlyincreasedtheexpressionsofTGF-β1andMCP-1inMC.AfteraddingPNS,theexpressio

5、nlevelsofTGF-β1andMCP-1remarkablydecreasedcomparedwiththoseincellsstimulatedbyOX-LDL.NF-κBactivitymarkedlyincreasedafterstimulationbyOX-LDL,thetranslocationrateofp65fromcytoplasmtonucleuswashigherthanthatinthecontrolgroup.ThiseffectcouldbeinhibitedbyPNS.ConclusionOX-L

6、DLcouldpromoteexpressionsofTGF-β1andMCP-1inMC.PNScouldinhibitthispromotionofOX-LDL.TheeffectsofPNSontheactivationofNF-κBandtranslocationofp65maybeoneofthemechanisms.KEYWORDS:sanchinoside;lipoprotein,LDL;glomerularmesangium;cells,cultured;NF-kappaB;transforminggrowthfa

7、ctorbeta;monocytechemoattractantprolein-113氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)与肾脏疾病的进展有着密切联系[1]。肾小球系膜细胞在OX-LDL刺激下能够异常表达多种细胞因子,包括在组织中具有极强致纤维化效应的转化生长因子-β1(TGF-β1),以及介导单核-巨噬细胞向肾小球系膜区浸润的关键因子——单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1);这些细胞因子的异常表达与核转录因子-κB(NF-κB)有关[2-3]。笔者观察系膜细胞在OX-LDL与三七总甙(panaxnotoginsengsaponins,

8、PNS)作用后TGF-β1与MCP-1表达变化及NF-κB核转位情况,对PNS在脂质性肾损伤中可能的保护效应进行探讨。1材料与方法1.1材料大鼠肾小球系膜细胞(武汉中国典型培养物保藏中心),以含10%胎牛血清的MEM进行常规贴壁培养,OX-LDL(

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