甲状腺乳头状癌nm23h1、cd31表达与肿瘤转移关系的研究

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1、甲状腺乳头状癌nm23H1、CD31表达与肿瘤转移关系的研究【关键词】甲状腺乳头状癌nm23H1CD31肿瘤转移　　Abstract：［Objective］Tostudytheexpressionsofnm23H1,CD31inpapillarythyroidcancertissuesandthecorrelationphnodemetastasis.［Methods］nm23H1,CD31munohistochemistrymethodin55tomourtissuesand10normaltissues;theexpressionofCD31arkofthevascul

2、arendothelialcell,thetumormicrovasculardensity(MVD).［Results］Thepositiveexpressionrateofnm23H1inpapillarythyroidcancer23H1inpapillarythyroidcancertissuealthroidtissue(P<001).There23H1.［Conclusions］nm23H1promotesmicrovascularemergedinpapillarythyroidcancertissuesandplaysanimportantrolei

3、nthelymphnodesmetastasis.　　Keya;nm23H1;CD31;Tumormetastasis　　全世界甲状腺癌发病率约占全身恶性肿瘤的1%～2%，我国年发病率为05～40人/10万人，近几年来，我国甲状腺癌的发病率呈逐年上升趋势，尤其以女性明显增加，对人类健康危害极大。其中甲状腺癌分化性癌占80-90%，甲状腺乳头状癌的转移方式多为淋巴结转移，年轻人的乳头状癌患者确诊时，淋巴结转移率高达90%［1］。目前，对甲状腺癌的转移机制尚不清楚。本文研究nm23H1（nonmetastaticgene23H1）和CD31在甲状腺乳头状癌的发生发展、转移关系，

4、为指导甲状腺癌临床诊断及判断预后提供参考。　　1材料与方法　　11临床资料收集2003年1月至2006年1月中甲状腺乳头状癌组织标本55例，年龄15~71岁（平均4356±1454），男11例，女44例。患者临床资料完整,术前均未接受化疗和放疗,均为经典根治术，有淋巴转移或远处转移的35例，无转移的20例，经病理检查证实均为原发甲状腺乳头状癌。TNM分期［1］：Ⅰ期16例，Ⅱ期19例，Ⅲ期18例，Ⅳ期2例。对照组为10例正常甲状腺组织，取自甲状腺癌周围组织（简称癌周组织），经病理检查确认均为正常组织。取手术切除的组织标本，经10%福尔马林固定,常规脱水透明、浸蜡、包埋，连续切

5、片，切片厚4μm，用于EnVisionTM免疫组织化学法。　　12主要试剂和免疫组织化学方法一抗为即用型兔抗人nm23H1多克隆抗体和鼠抗人CD31蛋白单克隆抗体（JC70A，M082301，Dako公司）；EnVisionTM试剂盒（Dako公司，工作液），购自上海基因公司。采用EnVisionTM两步法。石蜡切片常规脱蜡至水，微波修复抗原，3%H2O2溶液室温孵育20min，以消化内源性过氧化物酶，10%正常羊血清封闭30min，分别加一抗nm23H1，湿盒中孵育，4oC过夜，滴加二抗，EnVisionTM试剂室温孵育1h。各步骤间均以001mol/LPBS缓冲溶液冲洗

6、5min连续3次。DABH2O2显色，显微镜下控制时间，苏木素复染，脱水透明，中性树胶封片，OlympusBX41显微镜观察、照相。用PBS缓冲溶液代替一抗，作为阴性对照，以甲状腺乳头状癌癌周组织作对照组。　　13结果判断nm23H1免疫组化染色的阳性判定，细胞浆和部分细胞核着棕色颗粒者为阳性，不着色者为阴性。结果以显微镜下每张切片取5个高倍视野（200×），数每个高倍视野下的阳性细胞所占比例，并依据每高倍视野中阳性细胞率0%为阴性（-），10%～25%为弱阳性（+），26%～50%为中阳性（++），>50%为强阳性（+++），其中弱阳性和中阳性为低表达，强阳性为高表

7、达［2］。CD31结果判断及MVD计算：CD31的阳性表达产物主要分布于血管内皮细胞的胞浆内，呈棕黄色或棕褐色染色。每张切片在脉管高密度区，随机选取5个视野（200×，0075mm2），分别计数后，取平均值，作为该例肿瘤的MVD。　　14统计学处理计量资料两组间比较用t检验，计数资料两组间比较用χ2检验。采用SPSS130统计软件进行Spearmant等级相关分析检验。　　2结果　　21nm23H1在甲状腺癌中的表达nm23H1阳性表达产物主要分布于细胞质