甲状腺乳头状癌TGF-β1、nm23-H1、CD31表达及其与肿瘤转移的关系.doc

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1、甲状腺乳头状癌TGF-β1、nm23-H1、CD31表达及其与肿瘤转移的关系作者：方海飞　丁国芳　徐银峰【摘要】研究甲状腺乳头状癌组织中TGF-β1、nm23-H1和CD31的表达水平及其与甲状腺癌转移的关系。方法应用EnVisionTM免疫组织化学法检测55例甲状腺乳头状癌和10例癌周组织TGF-β1、nm23-H1和CD31的表达；并计数CD31标记的肿瘤组织微血管密度（MVD）。结果甲状腺乳头状癌组织中TGF-β1阳性表达率76.37％、nm23-H1阳性表达率65.46％，均高于癌周组织，两者之间的差异有统计学意义（χ2分别=16.64、10.

2、61，P均＜0.05）；MVD与TGF-β1的表达之间存在正相关关系(r=0.70，P＜0.05)，MVD与nm23-H1的表达之间存在负相关关系(r=-0.62，P＜0.05)。结论甲状腺乳头状癌中TGF-β1、nm23-H1和CD31表达水平可作为判断病情进展和肿瘤转移的指标之一。【关键词】甲状腺乳头状癌；TGF-β1；nm23-H1；MVD；肿瘤转移ＡｂｓｔｒａｃｔＯｂｊｅｃｔｉｖｅTostudytheexpressionsofTGF-β1,nm23-H1,CD31inpapillarythyroidcancer(PTC)tissuesandit

3、srelationwiththelymphnodemetastasis.MethodsTGF-β1,nm23-H1,CD31weredetectedbyEnVisionTMimmunohistoche-mistrymethodin55tumourtissuesand10normaltissues;theexpressionofCD31wasusedforthemarkofthevascularendothelialcell,thetumormicrovasculardensity(MVD).ResultsThepositiveexpressionrat

4、esofTGF-β1andnm23-H1inpapillarythyroidcancerwere76.37％and65.46％,TheexpressionlevelsofTGF-β1andnm23-H1inpapillarythyroidcancertissuewerehigherthanthatinnormalthroidtissue(χ2=16.64,10.61，P＜0.05).TherewaspositiverelationshipbetweenMVDandTGF-β1(r=0.70,P＜0.05).Therewasnegativerelatio

5、nshipbetweenMVDandnm23-H1(r=-0.62,P＜0.05).ConclusionsTGF-β1,nm23-H1,andCD31maybeusedtoestimatetheprogressionandlymphnodemetastasis.Ｋｅｙｗｏｒｄｓpapillarythyroidcancer;TGF-β1;nm23-H1;MVD;tumormetastasis发甲状腺乳头状癌，其中有淋巴转移或远处转移者35例，无转移者20例。按UICC2002年TNM临床分期：Ⅰ期16例，Ⅱ期19例，Ⅲ期18例，Ⅳ期2例。对照组为10例正

6、常甲状腺组织，取自甲状腺癌周围组织（简称癌周组织），经病理检查确认均无肿瘤。1.2　主要试剂和免疫组织化学方法　一抗为兔抗人TGF-β1多克隆抗体（SC-146，由美国Santa4Cruz公司生产）、即用型兔抗人nm23-H1多克隆抗体和鼠抗人CD31蛋白单克隆抗体（JC70A，M082301，由德国Dako公司生产）；EnVisionTM试剂盒（由Dako公司生产）。所有标本经10％福尔马林固定,常规脱水透明、浸蜡、包埋，连续切片，切片厚4μm，用于EnVisionTM免疫组织化学法。石蜡切片常规脱蜡至水，微波修复抗原，3％H2O2溶液室温孵育20m

7、in，以消化内源性过氧化物酶，10％正常羊血清封闭30min，分别加一抗nm23-H1，湿盒中孵育，4℃过夜，滴加二抗，EnVisionTM试剂室温孵育1h。各步骤间均以0.01mol/LPBS缓冲溶液冲洗5min连续3次。DAB-H2O2显色，显微镜下控制时间，苏木素复染，脱水透明，中性树胶封片，OlympusBX-41显微镜观察、照相。用PBS缓冲溶液代替一抗作为阴性对照，以甲状腺乳头状癌癌周组织作对照组。1.3　结果判断　TGF-β1和nm23-H1免疫组化染色的阳性判定，细胞浆和部分细胞核着棕色颗粒者为阳性，不着色者为阴性。结果以显微镜下每张切

8、片取5个高倍视野（200×，0.075mm2），计数阳性细胞所占比例，＜10％为阴性（－）；1