甲状腺乳头状癌nm23H1、CD31表达与肿瘤转移关系的研究

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1、甲状腺乳头状癌nm23H1、CD31表达与肿瘤转移关系的研究作者：方海飞沈美萍徐银峰【摘要】　　［目的］研究甲状腺乳头状癌组织中nm23H1和CD31的表达水平与甲状腺癌转移的关系。［方法］应用EnVisionTM免疫组织化学法检测55例甲状腺乳头状癌和10例癌周组织nm23H1蛋白和CD31蛋白的表达；并计数CD31标记的肿瘤组织微血管密度。［结果］甲状腺乳头状癌组织中nm23H1阳性表达率为%，均高于癌周组织，差异有统计学意义；微血管密度与nm23H1的表达之间存在负相关关系。［结论］nm23H1抑制甲状腺癌肿瘤微血管形成，在抑制肿瘤转移中起重要的作用

2、。【关键词】甲状腺乳头状癌nm23H1CD31肿瘤转移Abstract：［Objective］Tostudytheexpressionsofnm23H1,CD1inpapillarythyroidcancertissuesandthecorrelationwiththelymphnodemetastasis.［Methods］nm23H1,CD31weredetectedbyEnVisionTMimmunohistochemistrymethodintomourtissuesand10normaltissues;theexpressionofCD31wasuse

3、dforthemarkofthevascularendothelialcell,thetumormicrovasculardensity(MVD).［Results］Thepositiveexpressionrateofnm23H1inpapillarythyroidcancerwas546%,Theexpressionlevelsofnm23H1inpapillarythyroidcancertissuewerehigherthaninnormalthroidtissue(PKeywords:Papillarythyroidcancinoma;nm23H1;

4、CD1;Tumormetastasis　　全世界甲状腺癌发病率约占全身恶性肿瘤的1%～2%，我国年发病率为05～40人/10万人，近几年来，我国甲状腺癌的发病率呈逐年上升趋势，尤其以女性明显增加，对人类健康危害极大。其中甲状腺癌分化性癌占80-90%，甲状腺乳头状癌的转移方式多为淋巴结转移，年轻人的乳头状癌患者确诊时，淋巴结转移率高达90%［1］。目前，对甲状腺癌的转移机制尚不清楚。本文研究nm23H1和CD31在甲状腺乳头状癌的发生发展、转移关系，为指导甲状腺癌临床诊断及判断预后提供参考。　　1材料与方法11临床资料收集XX年1月至XX年1月中甲状腺乳头状癌组

5、织标本55例，年龄15~71岁，男11例，女44例。患者临床资料完整,术前均未接受化疗和放疗,均为经典根治术，有淋巴转移或远处转移的35例，无转移的20例，经病理检查证实均为原发甲状腺乳头状癌。TNM分期［1］：Ⅰ期16例，Ⅱ期19例，Ⅲ期18例，Ⅳ期2例。对照组为10例正常甲状腺组织，取自甲状腺癌周围组织，经病理检查确认均为正常组织。取手术切除的组织标本，经10%福尔马林固定,常规脱水透明、浸蜡、包埋，连续切片，切片厚4μm，用于EnVisionTM免疫组织化学法。12主要试剂和免疫组织化学方法一抗为即用型兔抗人nm23H1多克隆抗体和鼠抗人CD31蛋白单克隆抗

6、体；EnVisionTM试剂盒，购自上海基因公司。采用EnVisionTM两步法。石蜡切片常规脱蜡至水，微波修复抗原，3%H2O2溶液室温孵育20min，以消化内源性过氧化物酶，10%正常羊血清封闭30min，分别加一抗nm23H1，湿盒中孵育，4oC过夜，滴加二抗，EnVisionTM试剂室温孵育1h。各步骤间均以001mol/LPBS缓冲溶液冲洗5min连续3次。DABH2O2显色，显微镜下控制时间，苏木素复染，脱水透明，中性树胶封片，OlympusBX41显微镜观察、照相。用PBS缓冲溶液代替一抗，作为阴性对照，以甲状腺乳头状癌癌周组织作对照组。13结

7、果判断nm23H1免疫组化染色的阳性判定，细胞浆和部分细胞核着棕色颗粒者为阳性，不着色者为阴性。结果以显微镜下每张切片取5个高倍视野，数每个高倍视野下的阳性细胞所占比例，并依据每高倍视野中阳性细胞率0%为阴性，10%～25%为弱阳性，26%～50%为中阳性，>50%为强阳性，其中弱阳性和中阳性为低表达，强阳性为高表达［2］。CD31结果判断及MVD计算：CD31的阳性表达产物主要分布于血管内皮细胞的胞浆内，呈棕黄色或棕褐色染色。每张切片在脉管高密度区，随机选取5个视野，分别计数后，取平均值，作为该例肿瘤的MVD。14统计学处理计量资料两组间比较用