汉族冠心病与abca1基因c69t多态性的相关研究

《汉族冠心病与abca1基因c69t多态性的相关研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、汉族冠心病与ABCA1基因C69T多态性的相关研究：王玉明　李亚　郑人源　潘克俭【摘要】　　目的探讨ATP-BindingCassetteTransporter1(ABCA1)基因C69T多态与汉族冠心病（CHD）的关系。方法以264例CHD患者和278名性别、年龄匹配的正常人为对象进行病例-对照研究；采用PCR-RFLP技术对ABCA1基因C69T多态位点进行分析。结果ABCA1基因C69T多态在CHD组与对照组分布差异无统计学意义（P＞0.05）;CC基因型和T等位基因携带者患者间各项血脂水平及心血管事件发生率比较差异均无

2、统计学意义。结论ABCA1基因C69T多态性与汉族人群CHD不存在关联。【关键词】冠心病；ABCA1基因；动脉粥样硬化；单核苷酸多态性Abstract：ObjectiveToinvestigatetherelationshipbetorphismandcoronaryheartdiseaseintheHanpeople.Methods264CHDpatientsand278age，sex-matchedcontrolsubjectsorphisminABCA1genebyPCR-RFLPmethod.ResultsThedis

3、tributionsofABCA1allelicandgenotypicfrequenciesdidnotsignificantlydifferbetalipidlevelsorphisminABCA1geneisnotcorrelatedorphism收稿日期２００６－０３－２４修回日期２００６－０４－０５简介王玉明(１９５８－），河南郑州人，副教授，医学硕士。通讯研究表明，血浆中高密度脂蛋白（HDL）水平与动脉粥样硬化的发生呈负相关［1］。ABCA1基因编码一种跨膜蛋白，该蛋白参与调控胆固醇的细胞流出过程，从而在胆固醇逆

4、向转运和HDL生成的起始阶段发挥关键的作用［2］。文献报道，ABCA1基因突变导致细胞内胆固醇流出减少，血浆中高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）严重缺乏，早发CHD的风险增高［3、4］。此外，ABCA1基因的某些单核苷酸多态也可影响血脂水平或个体对CHD的易感性［5］。我们对四川汉族健康人群和CHD患者ABCA1基因C69T多态进行了筛查，并探讨了该多态与CHD的关系。1对象和方法1.1对象1.1.1对照组无血缘关系的四川地区汉族健康个体278名（男165名、女113名），平均年龄(58.9±8.7)岁，经询问病史、体检、心电图

5、等检查排除心血管疾病史。1.1.2冠心病组冠心病患者264例（男158例、女106例），平均年龄(60.3±8.8)岁。所有病例均经冠状动脉造影证实为CHD，其冠状动脉至少有一支狭窄度≥50%。1.2方法1.2.1血脂水平的检测研究对象均采用禁食12h后取外周血5ml测定血脂水平。TG（甘油三酯）和TC（总胆固醇）采用氧化酶法测定，HDL-C、LDL-C（低密度脂蛋白胆固醇）用PEG变构酶法测定。1.2.2研究个体DNA的制备采集病例与对照外周血5ml，ACD抗凝。盐析法抽提DNA。1.2.3ABCA1基因多态片段的PCR扩增

6、根据基因组序列设计PCR引物，引物序列为：正向：5′—GGCTTTGACCGATAGTAACCT—3′、反向：5′—CTCTTTCTCCTACCCCTTGAC—3′。扩增片段长度为270bp。PCR反应体系：总体积25μl，包括1.5μl基因组DNA，TaqDNA聚合酶1U，MgCl2浓度1.5mmol/L，10×buffer2.5μl，dNTP各200μmol/L。扩增条件：94℃预变性5min，94℃变性30s，56℃退火40s，72℃延伸30s，共35个循环，最后72℃延伸5min。1.2.4PCR产物的酶切消化取10μ

7、lPCR产物，分别加入4U限制性内切酶BsmA1，2μl10×酶切缓冲液,并加超纯水至总体积20μl，37℃水浴保温16h。酶切产物经2.5%琼脂糖凝胶电泳，凝胶分析仪判定基因型。Fig.1ElectrophoresisresultofPCR-RFLPanalysisofC69TpolymorphismLane1:TThomozygote;Lane2、4、6:CChomozygote;Lane3、5:CTheterozygote;M:DNAmarker(puc19/MspI)2.1基因型的鉴定PCR产物经酶切后，电泳显示3种基

8、因型：CC基因型，无酶切位点，显示270bp一条带；TT基因型，存在酶切位点，显示207bp一条带（酶切产生的63bp小片段未显示）；CT基因型，显示270bp、203bp两条带(图1)。2.2CHD组与对照组间基因型和等位基因频率的比较（表1）两种多态基因型在两组人群中分布