牛ABCA1基因多态性及QSOX1和ABCA1基因与脂代谢的关系研究

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1、分类号：S813.3单位代码：10183研究生学号：2015882020密级：公开牛吉林大学ABCA基因多态性及1硕士学位论文（学术学位）QS牛ABCA1基因多态性及QSOX1和ABCA1基因与脂代谢的关系OX和1A研究BCA基因与脂代谢的关系研究1ThestudyonBovineABCA1genepolymorphismandtherelationshipbetweenABCA1andQSOX1genelipidmetabolism作者姓名：刘小川专业：动物遗传育种与繁殖研究方向：动物遗传育种指导教师：于仙忠教授培养单位：吉林大学2018年06月牛ABCA1基因多态性及QSOX1和ABCA

2、1基因与脂代谢的关系研究ThestudyonBovineABCA1genepolymorphismandtherelationshipbetweenABCA1andQSOX1genelipidmetabolism作者姓名：刘小川专业名称：动物遗传育种与繁殖指导教师：于仙忠教授学位类别：农学硕士答辩日期：2018年6月5日《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》投稿声明I中文摘要牛ABCA1基因多态性及QSOX1和ABCA1基因与脂代谢的关系研究西门塔尔牛在世界各国都有饲养，其品种分为乳用、肉用、乳肉兼用等类型。中国的西门塔尔牛是我国从瑞士引进后经过几代的杂交改良，现己成为我国一种大型的乳肉兼用牛

3、的优良品种。中国荷斯坦奶牛（1997年以前称中国黑白花奶牛）是19世纪末期，由中国的黄牛与当时引进我国的荷斯坦牛杂交，经过1970到1980年的不断选育，而逐渐形成的。在本研究中，先采用PCR-RFLP的方法对ABCA1基因遗传多态性进行了检测，进一步分析ABCA1基因SNP位点与中国荷斯坦奶牛产奶性状的相关性。最近，QSOX1被发现参与了各种生物过程，包括病毒复制、胚胎发育、炎症和癌症。可溶性二聚蛋白的结构完整性已被证实与QSOX1有显著相关性，可在细菌中通过人类的QSOX1基因联合表达，在细菌中获得适当的可溶性二聚蛋白蛋白质。为了进一步验证ATP腺苷三磷酸结合盒转运子A1（ABCA1）基

4、因和牛胎儿成纤维细胞与中国荷斯坦奶牛的乳脂代谢之间的关系，提高牛奶的质量以满足不同的人群，本研究通过RNAi技术检测了ABCA1的作用。据我们所知，ABCA1的作用尚未被RNA干扰（RNAi）水平证实。因此，我们利用FuGENEHD转染试剂介导的RNA干扰技术降低中国荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞（BMECs）及成纤维细胞（BFF）内源基因表达水平，特异性沉默两种基因，分析细胞生物学功能的变化。在mRNA和蛋白质水平，分别用RNAi处理前后的荧光定量PCR技术，蛋白质印迹和TG-kit分析细胞内甘油三酯（TG）含量[1-3]。结果显示，通过荧光定量PCR技术，RNA干扰后，ABCA1基因和QSOX1

5、基因mRNA表达量显著降低，通过western技术，蛋白水平显著降低。通过TG-kit试剂盒，检测结果显示RNA干扰后，基因在细胞中的TG含量表达显着降低。研究结果表明，ABCA1基因和QSOX1基因是中国荷斯坦奶牛乳腺组织和成纤维细胞中甘油三酯合成的重要基因，可能与奶牛乳脂率的合成有关。本研究为建设低脂奶牛提供理论依据。II关键词：中国荷斯坦奶牛；ABCA1；QSOX1；RNA干扰；甘油三酯；牛乳腺上皮细胞；成纤维细胞IIIAbstractBovineABCA1genepolymorphismandthestudyontherelationshipbetweenABCA1andQSOX1g

6、enelipidmetabolismThesisimalcattlearebredinallcountriesoftheworld,andtheirvarietiesaredividedintomilk,meatandmilk.Chinesesisimalbullisakindoffinebreedofcow,whichhasbeenintroducedfromSwitzerlandandhasbeenimprovedbyseveralgenerations.Chineseholsteincows(1997yearsagoChinapieboldcows)istheendofthe19thc

7、entury,byaChinesecattlewiththeintroductionofChineseholsteincows,after1970to1980yearsofbreeding,andgraduallyformed.Inthisstudy,pcr-rflpwasusedtodetectthegeneticpolymorphismofABCA1geneandfurtheranalyzethecorr