正己烷致大鼠脂质过氧化及肝细胞dna损伤的实验研究

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1、正己烷致大鼠脂质过氧化及肝细胞DNA损伤的实验研究作者：齐宝宁，易建华，唐国慧，苗江丽，郭剑锋【摘要】目的研究正己烷(nhexane)对大鼠的脂质过氧化作用和肝细胞DNA损伤的影响。方法40只雄性SD大鼠随机分成5组，即阴性对照组、75、150、300mg/kg染毒组和阳性对照组，每组8只。经腹腔注射染毒4周后，检测肝组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)的活力，血清还原型谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)的含量；用彗星试验技术(SCGE)检测大鼠肝细胞DNA的损伤。结果大鼠体重随染毒时间而增加，阴性对照组增加最快；随染毒剂

2、量增加，肝组织匀浆中SOD、GSHPx活力、血清GSH含量明显降低，而血清MDA含量增大，组间比较有显著性差异(P<0.05或P<0.01)；肝细胞SCGE检测彗星尾长、尾DNA(%)、尾矩、Olive尾矩均增大，组间比较有显著性差异(P<0.01)，尾矩值与染毒剂量作相关分析，相关系数r为0.981，呈正相关(P<0.05)。结论正己烷可引起或增强机体氧自由基反应，导致脂质过氧化损伤和肝细胞DNA损伤。【关键词】正己烷；脂质过氧化；DNA损伤；单细胞凝胶电泳技术正己烷(nhexane，CAS:110543)属于直链饱和脂肪烃

3、类，化学式为C6H14，分子式为CH3(CH2)4CH3，分子量86.18；无色、高挥发性、易燃、常温下为微有异臭的液体；几乎不溶于水，易溶于氯仿、乙醚、乙醇[12]。正己烷主要作为溶剂，广泛应用于制鞋、印刷、电子、粘胶配制、除污、干洗、植物油提取等行业[3]。有　　1.2.4组织匀浆抗氧化酶活力测定　　立即取新鲜肝脏组织块(0.2-1g)，除去血液，滤纸拭干，称重，加入9倍重量的冷生理盐水，用组织匀浆机制成10%匀浆液，检测SOD和GSHPx活力。SOD活力测定按邻苯三酚自氧化法，GSHPx活力测定按二硫代二硝基苯甲酸(dithiobisnitr

4、obenzoicacid,DTNB)直接法。　　1.3统计学处理　　测定值以均数±标准差(±s)表示，采用SPSS11.5软件对数据进行分析，多组均数之间的比较采用单因素方差分析(ANOVA)，两组之间的多重比较分别采用Duntt检验和SNKq检验。　　2结果　　2.1大鼠体重的变化　　实验期间，各组体重均随时间而增加，对照组体重增加最快，低剂量组与对照组比较无明显差异。在0、3、6、12、21、28d时分别作方差分析，从第6天开始，组间有显著性差异(P<0.05)；各实验组与阴性对照组作Duntt检验，中、高剂量组与对照组之间有显著性差异(P&

5、lt;0.05或P<0.01)；各实验组之间再作SNKq检验，低剂量组和高剂量组有显著性差异(P<0.05，表1)。表1各剂量组大鼠在不同时间的体重变化（略）　　2.2正己烷对大鼠血清MDA和GSH含量的影响　　血清中MDA含量随染毒剂量增加而增大，GSH含量则随染毒剂量增加而减少，作方差分析，组间有显著性差异(P<0.05)；各实验组与阴性对照组作Duntt检验，中、高剂量组与对照组之间有显著性差异(P<0.05或P<0.01)；实验组之间再做SNKq检验，低剂量组和高剂量组有显著性差异(P<0.05，表2)。表2

6、各组大鼠血清中MDA、GSH含量的变化（略）　　2.3正己烷对大鼠肝组织匀浆SOD和GSHPx活力的影响　　肝组织匀浆中GSHPx、SOD活力随染毒剂量增加而减小，作方差分析，组间有显著性差异(P<0.05)；各实验组与阴性对照组做Duntt检验，高剂量组与对照组之间有显著性差异(P<0.01)；实验组之间再作SNKq检验，低剂量组和高剂量组有显著性差异(P<0.05，表3)。表3各剂量组大鼠肝组织匀浆SOD、GSHPx的活力（略）　　2.4正己烷对大鼠肝细胞DNA损伤的影响　　随着染毒剂量的增加，尾长、尾DNA(%)、尾矩、Ol

7、ive尾矩值均增大。各实验组与对照组做Duntt检验。结果显示，阳性对照组与阴性对照组比较，尾长、尾DNA(%)、尾矩、Olive尾矩均有显著性差异(P<0.01)；中、高剂量组与阴性对照组比较，尾长、尾DNA(%)、尾矩、Olive尾矩有显著性差异(P<0.01)；低剂量组与阴性对照组比较，无显著性差异。实验组之间再做SNKq检验，低剂量组和高剂量组有显著性差异(P<0.05，表4)。　　2.5大鼠肝细胞SCGE结果的相关分析　　以染毒剂量为横坐标，尾矩值为纵坐标做散点图，观察随正己烷染毒剂量的增加对大鼠肝细胞DNA损伤的剂量效应关

8、系。做相关分析，相关系数r为0.981，呈正相关(P