乳腺肿瘤vegf表达的免疫组化研究

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1、乳腺肿瘤VEGF表达的免疫组化研究作者：王岭，张聚良，袁世芳，马福成，王映梅【关键词】乳腺肿瘤　　关键词:乳腺肿瘤;血管内皮生长因子;基因;表达　　0引言.L.编辑。　　实体肿瘤的生长及转移很大程度上依赖于持续的、不可控制的血管生成.肿瘤的血管生成赖于多种相关因子的诱导和调节，而生长因子是重要的始动因素，VEGF是近年发现的血管生成调节因子，可以特异性作用于EC，促使血管形成.我们旨在观察VEGF在不同乳腺组织中的表达，以明确VEGF表达与肿瘤血管生成的关系，进一步探讨VEGF在乳腺肿瘤生长中的作用.　　1材料和方法　　1.1材料　　1998/1999乳腺纤维腺瘤标本20例，乳腺癌标本40

2、例，其中23例伴有区域淋巴结转移，正常乳腺组织6例取自我院手术患者.所有标本常规福尔马林固定，石蜡包埋，4μm连续切片.兔抗VEGF多克隆抗体为SantaCruz公司产品;兔抗FactorⅧ单克隆抗体购自北京生物技术公司.　　1.2方法　　切片脱蜡至水，1mLL-1过氧化氢封闭内源性过氧化物酶，胰酶消化，加入稀释后一抗4℃过夜，此后按SP操作说明书进行，以PBS代替一抗作空白对照.每例标本均同时进行FactorⅧ及VEGF染色.结果判定以胞质或（和）胞膜有明确棕黄色着色为阳性细胞，高倍视野阳性细胞>10个即为阳性病例.每张切片于着色明显处计数10个高倍视野，计算MVD及VEGF阳性细

3、胞率，结果采用χ2检验和完全随机化设计资料均数的t检验进行统计分析.　　2结果　　2.1FactorⅧ染色结果　　FactorⅧ在正常乳腺组织及乳腺纤维腺瘤组织中平均MVD分别为（12.0±4.5）/200视野和（17.5±8.0）/200视野;在乳腺癌组织中，可见FactorⅧ阳性内皮细胞聚集，胞质增多，增殖明显.平均MVD为（72.5±12.0）/200视野，较正常乳腺组织及乳腺纤维腺瘤显著增高（P<0.05）.　　2.2VEGF染色结果　　VEGF阳性细胞多为乳腺癌细胞，少数为巨噬细胞及成纤维细胞.阳性着色主要位于胞质.40例乳腺癌标本中，阳性病例29例（72%），而20例乳腺

4、纤维腺瘤中阳性病例5例（25%），与乳腺癌相比差别显著（P<0.01），正常乳腺组织中未见阳性表达.乳腺癌组织中VEGF平均阳性细胞率（58±4）%亦明显高于纤维腺瘤组织（19±2）%（P<0.01）.　　2.3MVD，VEGF及乳腺肿瘤恶性程度的关系　　在乳腺癌组织中，均有MVD及VEGF增加，而伴有区域淋巴结转移者与无临床转移者相比，未见明显差异.　　3讨论　　肿瘤组织如果没有新生血管的支持，将无法生长到1mm3以上.我们的实验表明，在乳腺癌组织中，MVD较正常乳腺组织及乳腺纤维腺瘤明显增多，显示血管生成情况与肿瘤的生长密切相关.肿瘤的血管生成是一个复杂的过程，受到严格调控

5、，确切的机制尚不清楚.本实验表明，在乳腺癌组织中VEGF呈强阳性表达，而正常乳腺组织及乳腺纤维腺瘤组织中表达很低，进一步揭示VEGF对血管生成乃至肿瘤的恶性生长具有重要作用.在某些生理状态下，如女性生殖周期过程中，VEGF仅有一过性表达增高［1］.而病理状态下肿瘤的血管生成处于一种“失控”状态，癌变的细胞表型发生了变化，导致VEGF持续存在，促进了肿瘤的血管生成，进而促使肿瘤生长和远处转移.VEGF受控表达的机制仍有待进一步研究和证实，缺氧和某些炎症因子可能参与于其中的调节［2］.　　参考