VEGF、CD34在乳腺癌中的表达研究.doc

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1、VEGF、CD34在乳腺癌中的表达研究作者：姜乃光李秋霞单景军张玉英石青岭【关键词】免疫组织化学　　【摘要】目的探讨血管内皮细胞生长因子（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF）与乳腺癌血管生成及临床病理参数的关系。方法采用S-P免疫组化法，检测54例乳腺癌石蜡标本中VEGF蛋白的表达及平均微血管密度（miscrovesseldensity，MVD）。结果癌组织中VEGF表达阳性率为75.93%。VEGF表达及MVD值与组织学分级（P<0.05）和淋巴结转移密切相关（P<0.01），而与组织学

2、分型无关（P>0.05）;VEGF阳性组MVD值明显高于VEGF阴性组（t=2.220，P<0.05）。结论VEGF与乳腺癌血管生成密切相关，并能促进其生长、浸润及转移。检测VEGF和MVD可作为反映乳腺癌生物学行为的指标之一。　　关键词乳腺肿瘤血管内皮细胞生长因子血管生成免疫组织化学　　肿瘤的生长和转移是一个多步骤的复杂过程，在很大程度上依赖于肿瘤血管生成。目前的研究认为:血管内皮细胞生长因子（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF）是肿瘤血管生成过程中作用最强、特异性最高的促血管生长因子［

3、1］。笔者应用免疫组化法检测乳腺癌组织中VEGF和MVD的表达情况，分析VEGF及微血管密度（miscroresseldensity，MVD）与乳腺癌各临床病理参数的关系，并为临床预后判定和治疗提供进一步的理论根据。　　1材料与方法　　1.1标本来源选取我院普外科1996～2003年乳腺癌根治术或改良根治术切除标本54例。病理及临床资料分析结果:浸润性癌40例，其他特殊类型癌14例。组织学分级:Ⅰ级9例，Ⅱ级32例，Ⅲ级13例。有淋巴结转移者30例，无淋巴结转移者24例。患者均为女性，年龄23～68岁（平均52岁），术前均未经任何治疗。　

4、　1.2主要试剂所用VEGF、CD34单克隆抗体及超敏（鼠）S-P试剂盒，均购自福州迈新生物技术开发公司。　　1.3S-P免疫组化染色操作步骤从略。其中鼠抗人VEGF单克隆抗体采用高温高压进行抗原修复。每次试验以PBS缓冲液代替一抗作为阴性对照，以已知VEGF阳性的切片作为阳性对照。　　1.4结果判定　　1.4.1VEGF表达根据阳性细胞数及染色强度进行综合判定，即按5%以上细胞浆或细胞膜呈棕黄色染色者为VEGF蛋白表达阳性。4　　1.4.2MVD计数参照Maeda等报道［2］的方法，即低倍镜下，全面观察CD34染色阳性的血管，选取肿瘤微

5、血管密度最高区域，然后在高倍镜下（×200）选取5个不重复视野进行计数，求其平均数即作为该病例的MVD值。统计的微血管标准:单个的棕黄色内皮细胞或内皮细胞团均计数为一个血管;肌层较厚及管腔红细胞数>8个的血管不被计数。　　1.5统计学方法采用χ2检验、t检验、F检验及q检验。　　2结果　　2.1VEGF蛋白表达VEGF蛋白定位于肿瘤细胞胞浆及胞膜，阳性表达为胞浆或胞膜染为棕黄色，呈弥漫或散在的颗粒状。在54例乳腺癌组织中，VEGF表达阳性41例（75.93%），癌间质内皮细胞不表达或呈弱阳性表达，癌旁组织几乎不表达。　　2.2MVD

6、检测CD34定位于血管内皮细胞胞浆，呈棕黄色。所有的病例的血管内皮细胞均为CD34染色阳性。癌组织MVD值11～106个不等，平均为（49.5±25.4）个。　　2.3VEGF蛋白表达及MVD与临床病理参数间的关系　　2.3.1组织学分级VEGF表达阳性率及MVD值随组织学分级增高而逐渐增加。VEGF表达在Ⅰ级与Ⅱ级、Ⅰ级与Ⅲ级间，差异具有显著性（P均<0.05）。单因素方差分析显示，三组间MVD值比较差异具有非常显著性（P<0.01）。两组间比较:Ⅰ级与Ⅱ级、Ⅰ级与Ⅲ级间差异有显著性（P<0.05和P<0.01）

7、。而Ⅱ级与Ⅲ级间VEGF表达阳性率及MVD值差异均无显著性（P>0.05）。　　2.3.2淋巴结转移VEGF表达阳性率在有淋巴结转移组明显高于无淋巴结转移组（P<0.01）。MVD值在两组间差异也具有非常显著性（P<0.01）。　　2.3.3组织学类型VEGF表达阳性率和MVD值在两个不同组织学类型间差异无显著性（P>0.05）。　　2.4VEGF表达与MVD值的关系VEGF表达阳性组的MVD值明显高于VEGF表达阴性组（P<0.05）。　　3讨论　　VEGF是目前研究较为深入的促血管生成因子，对肿瘤基质血管

8、形成及肿瘤生物学行为均有重要影响。VEGF也称血管渗透因子（VPF），是特异性的血管内皮细胞刺激因子，它与血管内皮细胞的相应受体结合，刺激血管内皮细胞的增殖，同时还可促进血管内物质的泄露，导致