激素性骨坏死关节软骨下皮质骨病理改变的实验研究

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1、激素性骨坏死关节软骨下皮质骨病理改变的实验研究作者：张德志，胡蕴玉，费正奇，吕荣，王军【关键词】激素性骨坏死　　摘要：　　［目的］观察激素性骨坏死关节塌陷早期软骨下皮质骨的病理形态改变，分析关节塌陷的原因。［方法］将新西兰白兔分为两组，A组复制激素增强的Shan反应骨坏死模型，B组为空白对照组。停药后10周获取肱骨头标本，分别制备脱钙和不脱钙切片，脱钙标本HE染色，观察软骨下皮质骨改变，哈佛管计数。不脱钙标本进行荧光观察，比较软骨下皮质骨形态、结构；扫描电镜观察，比较软骨下微循环改变、软骨下方骨组织形态、结构改变。［结果］A组标本出现

2、坏死改变。软骨下方骨组织内哈佛管减少消失，即软骨下皮质骨及由其构成的球拱、桥拱结构破坏，支撑软骨层的骨组织呈松质骨改变。有部分肱骨头出现关节塌陷早期改变。软骨下微血管内广泛存在红细胞淤滞、填塞现象。B组软骨下方骨组织具有较丰富的哈佛管，为皮质骨。完整且连续的皮质骨支撑关节软骨，同时构成球拱、桥拱结构。软骨下微血管内无红细胞淤滞、填塞现象。［结论］关节软骨下皮质骨缺失是关节发生塌陷的原因。软骨下微循环障碍是其重要原因。　　关键词：激素性骨坏死；软骨下皮质骨；关节塌陷；兔　　Abstract：［Objective］Toinvestigat

3、ethemorphologicalchangesthattakeplaceinthesubchondralcocorticalboneinsteroidinducedosteonecrosisandanalyzethereasonsleadingtohumeralheadcollapseinjuvenilerabbits.［Method］FivesixmontholdfemalerabbitsodifiedversionofthemethodsinalhumeralheadmodelsanreactioningroupA,andgro

4、upBservedasthesinglecontrol.Eachhumeralheadberofhaversiancanalsicrocirculatorychangesicroscope.［Result］IngroupA,theHaversiancanalsin'subchondralareaalmostdisappeared;thesubchondralcorticalbonedisappearedeandbridgestructures.Microcirculatorystasishappenedinthesubchondral

5、vessels.Somehumeralheadscollapseingarch,domeandbrigestructuresajorreasonleadinghumeralheadcollapse,andischemiaisthecriticalreasonofit.　　Keyan反应模型［3］，给予脂多糖和地塞米松；B组：6只，为空白对照组，给予生理盐水。　　12试剂与准备　　脂多糖(LPS)购自Sigma公司，大肠埃希杆菌来源、血清型0111：B4。LPS粉剂称重，分装，保存于2～8℃下。滤器内放置浸泡过的双层02μm微孔滤膜，灭

6、菌备用。　　复溶、滤过除菌：实验前在超净台内将LPS复溶于生理盐水中，浓度为100μg／ml，即将LPS先溶于1／3量生理盐水，振荡20～30min；滤器内先注入生理盐水2ml，再将LPS加压注入滤器；在振荡状态下，将剩余生理盐水等分，分2次洗涤LPS容器和滤器;最后向滤器内加压注入空气，减少滤器内液体残留。更换注射器分装，置于4℃冰箱内保存。实验时需振荡20～30min后使用。用药间隔时间保持全程振荡状态。　　13动物建模　　A组实验第1、2d间隔24h于耳缘静脉缓慢注射LPS，剂量05ml／kg；第3～8d，耳缘静脉注射地塞米松，

7、每日1次，剂量75mg／kg。B组给予生理盐水(05ml／kg)。动物在无麻醉的清醒状态下给药。不给予抗菌素。相同条件下喂养。满10周取材。取材前48h饲料中添加土霉素(250mg／kg)。　　14观察指标　　141一般观察动物穿刺点情况，精神状态、进食状况观察。　　142大体观察观察肱骨头表面以及冠状面颜色以及顶部滑车是否光滑。　　143骨组织学、形态计量学观察沿冠状面将肱骨头自中线切开分为2份。1份标本10％中性甲醛固定，脱钙，脱水，石蜡包埋，切片，厚度4μm，HE染色，观察软骨下方骨组织改变：依照ClarkJM［4］给出的参数和

8、特征确定哈佛管；在软骨下部位，沿潮线方向进行哈佛管计数，计算单位长度(mm)内哈佛管数量(个／mm)。另1份标本80％酒精固定，不脱钙，脱水后塑料包埋，切片，厚度30μm，在荧光下观察骨结构的连续性，骨髓腔和软骨下方骨组