激素性骨坏死关节软骨下皮质骨病理改变的实验研究论文

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1、激素性骨坏死关节软骨下皮质骨病理改变的实验研究论文张德志，胡蕴玉，费正奇，吕荣，王军【关键词】激素性骨坏死摘要：［目的］观察激素性骨坏死关节塌陷早期软骨下皮质骨的病理形态改变，分析关节塌陷的原因。［方法］将新西兰白兔分为两组，A组复制激素增强的Shan反应骨坏死模型，B组为空白对照组。停药后10周获取肱骨头标本.freelorphologicalchangesthattakeplaceinthesubchondralcocorticalboneinsteroidinducedosteonecrosisandanalyzethereasonsleadingtohumeralheadcol

2、lapseinjuvenilerabbits.［Method］FivesixmontholdfemalerabbitsodifiedversionofthemethodsinalhumeralheadmodelsanreactioningroupA,andgroupBservedasthesinglecontrol.Eachhumeralheadberofhaversiancanalsicrocirculatorychangesicroscope.［Result］IngroupA,theHaversiancanalsin'subchondralareaalmostdisappeared

3、;thesubchondralcorticalbonedisappearedeandbridgestructures.Microcirculatorystasishappenedinthesubchondralvessels.Somehumeralheadscollapseingarch,domeandbrigestructuresajorreasonleadinghumeralheadcollapse,andischemiaisthecriticalreasonofit.Keyan反应模型［3］，给予脂多糖和地塞米松；B组：6只，为空白对照组，给予生理盐水。12试剂与准备脂多糖(LP

4、S)购自Sigma公司，大肠埃希杆菌来源、血清型0111：B4。LPS粉剂称重，分装，保存于2～8℃下。滤器内放置浸泡过的双层02μm微孔滤膜，灭菌备用。复溶、滤过除菌：实验前在超净台内将LPS复溶于生理盐水中，浓度为100μg／ml，即将LPS先溶于1／3量生理盐水，振荡20～30min；滤器内先注入生理盐水2ml，再将LPS加压注入滤器；在振荡状态下，将剩余生理盐水等分，分2次洗涤LPS容器和滤器;最后向滤器内加压注入空气，减少滤器内液体残留。更换注射器分装，置于4℃冰箱内保存。实验时需振荡20～30min后使用。用药间隔时间保持全程振荡状态。13动物建模A组实验第1、2d间隔24

5、h于耳缘静脉缓慢注射LPS，剂量05ml／kg；第3～8d，耳缘静脉注射地塞米松，每日1次，剂量75mg／kg。B组给予生理盐水(05ml／kg)。动物在无麻醉的清醒状态下给药。不给予抗菌素。相同条件下喂养。满10周取材。取材前48h饲料中添加土霉素(250mg／kg)。14观察指标141一般观察动物穿刺点情况，精神状态、进食状况观察。142大体观察观察肱骨头表面以及冠状面颜色以及顶部滑车是否光滑。143骨组织学、形态计量学观察沿冠状面将肱骨头自中线切开分为2份。1份标本10％中性甲醛固定，脱钙，脱水，石蜡包埋，切片，厚度4μm，HE染色，观察软骨下方骨组织改变：依照ClarkJM［4

6、］给出的参数和特征确定哈佛管；在软骨下部位，沿潮线方向进行哈佛管计数，计算单位长度(mm)内哈佛管数量(个／mm)。另1份标本80％酒精固定，不脱钙，脱水后塑料包埋，切片，厚度30μm，在荧光下观察骨结构的连续性，骨髓腔和软骨下方骨组织形态、结构。144微循环观察不脱钙切片经过脱塑，临界点干燥，喷金，扫描电镜下观察软骨下微血管内红细胞淤滞、填塞现象。145统计学处理所测数据以±s表示，用SPSS统计软件进行两样本均数比较的t检验。2结果21一般观察两组动物穿刺点均迅速愈合，无渗出、化脓。A组16动物中存活4只。实验第1周精神萎靡，进食状况差，1周后精神状态逐渐好转，进食量增加。22大体

7、观察表面观察：A组标本表面颜色不均匀，见形态不规则的白色区域(图1)；部分标本滑车加深，欠光滑。B组标本表面颜色呈均匀的淡红色，未发现白色区域(图2)；滑车较浅。冠状切面观察：A组标本切面内见大小不等的白色区域，界限清楚者被红色充血带包围；部分标本外侧顶部不平坦。B组标本切面未见白色区域，呈均匀的浅红色。23骨的组织学观察231脱钙切片观察骨坏死改变观察：A组标本出现骨坏死改变，小梁骨骨细胞核固缩、空骨陷窝很多；与软骨邻接的骨组织菲薄、凹凸不平