牛磺酸对fas系统介导烧伤后早期心肌细胞凋亡的影响-

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时间:2018-05-02

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1、牛磺酸对Fas系统介导烧伤后早期心肌细胞凋亡的影响*作者:万福生,龚文华,赵小曼,曾昭建,余乐涵,李华,李国辉【摘要】目的观察牛磺酸对烧伤后心肌细胞凋亡和Fas系统的影响及初步机制。方法选健康>P<0.05)。烧伤组心肌细胞凋亡指数与Fas表达之间有良好的相关性(r=0.86,P<0.05)。结论牛磺酸对Fas系统介导烧伤后大鼠心肌细胞凋亡有较好的抑制作用。【关键词】牛磺酸;Fas系统;细胞凋亡;心肌;烧伤EffectsoftaurineonFasantigeninvolvementinapoptosisofcardiomyocytesinearlypostburnsta

2、geolecularBiologyofJiangxiMedicalCollege,Nanchang330006,China【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheeffectsoftaurineontheapoptosisandexpressionchangeofFasantigenincardiomyocytesduringtheearlypostburnstage.MethodsHealthyadultC10μg(1μg/μl),37℃水浴60min,于激发波长385nm,发射波长465nm,测其荧光强度变化,其活性单位用DEVD-AMC

3、nmol/(h·mg)蛋白表示。1.6统计学处理所有实验数据均以x±s表示,采用SPSS11.0软件处理分析,两组间比较采用Student’st检验,多组间比较采用方差分析。2结果2.1烧伤后心肌细胞凋亡数目变化与假烫伤组(Sham)比较,烧伤组大鼠在伤后6~24h的不同时相点的心肌细胞凋亡指数均有显著性增加(P<0.01),在伤后12h,心肌细胞凋亡指数达峰值;烧伤加牛磺酸组心肌细胞凋亡指数显著性地低于烧伤组(P<0.05),表明牛磺酸对烧伤后心肌细胞凋亡有较好的拮抗作用(表1)。表1心肌细胞凋亡指数、FasmRNA表达及Caspase-3活性(x±s)注:与对照组比较

4、*P<0.05,**P<0.01;与烧伤组比较,ΔP<0.052.2心肌组织Fas基因mRNA表达心肌组织Fas基因mRNA经RT-PCR和电泳检测,经密度扫描仪测得Fas条带(436bp)与C-actin条带(389bp)峰面积积分,以Fas/actin比值表示Fas基因mRNA表达水平,结果显示,烧伤后3h心肌Fas基因mRNA表达即呈显著性升高,于伤后12h达峰值,伤后24hFas基因mRNA表达仍显著性高于假烫伤组。与烧伤组比较,在烧伤后3h,6h,12h及24h,烧伤加牛磺酸组心肌FasmRNA的表达均有显著性下降(P<0.05),表明牛磺酸对烧伤后心肌Fas基

5、因mRNA表达有一定的抑制作用。2.3心肌组织Fas/FasL、Caspase-8及Caspase-3蛋白表达的变化烧伤组大鼠心肌Fas蛋白表达在伤后3h即显著性高于对照组(P<0.05),于伤后12h达峰值,伤后24h仍显著高于对照组;FasL蛋白仅在伤后12h较对照组差异有显著性,Caspase-8蛋白在伤后3h也呈显著性增高,伤后24h仍高于对照组:Caspase-3蛋白表达在伤后6h开始呈显著性升高(见表2),伤后24h仍高于对照组。与烧伤组比较,烧伤加牛磺酸组心肌细胞中FasCaspase-8及Caspase-3蛋白表达在伤后6h、12h及24h均呈显著性降低(

6、P<0.05=。表2心肌组织Fas/FasL、Caspase-8和Caspase-3蛋白表达水平[PEi(%),x±s]注:与对照组比较*P<0.05,**P<0.01;与烧伤组比较,ΔP<0.052.4心肌组织Caspase-3活性变化烧伤组大鼠心肌Caspase-3活性在伤后3h即显著高于对照组(见表1),伤后12h达峰值,伤后24h仍然高于对照组;烧伤加牛磺酸组心肌细胞中Caspase-3活性在伤后6h、12h及24h较烧伤组均呈显著性降低(P<0.05)。2.5心肌细胞凋亡与Fas系统表达的相关性通过分析Fas蛋白表达指数(PEI)与心肌细胞凋亡指数(AI)间的关

7、系,结果发现二者间有良好的相关性(r=0.86,P<0.05)。并发现Fas蛋白表达与Caspase-3活性间也存在相关性(r=0.83,P<0.05)。3讨论最近研究表明[7],细胞凋亡也参与了烧伤后心肌损害,其机制主要与线粒体结构与功能损伤、氧自由基及钙平衡失调有关。然而,细胞凋亡在烧伤后心脏功能障碍中的病理生理意义目前尚未完全被阐明。不难设想,对心肌细胞凋亡及时防治,不仅有利于心肌细胞存活和心功能改善,也有利于严重烧伤后“休克心”的防治。目前,许多证据表明Fas系统参与了心力衰竭、病毒性心肌炎、心肌缺血及再灌注损伤的心肌

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