牛磺酸对fas系统介导烧伤后早期心肌细胞凋亡的影响-论文

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1、牛磺酸对Fas系统介导烧伤后早期心肌细胞凋亡的影响*论文.freel)、烧伤组(造成40%TBSAⅢ度烧伤)和烧伤加牛磺酸组(烫伤后即刻腹腔注射牛磺酸200mg/kg)。用原位末端标记(TUNEL)法检测凋亡细胞.freelRNA表达，免疫组化检测Fas/FasL和Caspase-8/3蛋白表达和荧光分析Caspase-3活性。结果烧伤组大鼠伤后6h、12h和24h心肌细胞凋亡指数分别为7.31±2.31、21.52±2.57和18.67±2.48，较对照组(0.92±0.34)有显著性升高，Fas蛋白阳性表达指数分别为13.51±1.56、21.02±2.34和14.55±1.89，

2、也显著性高于对照组(2.46±0.75)；Caspase-3活性分别为1.38±0.16、2.18±0.18和1.96±0.71，较对照组(0.35±0.06)差异有显著性。牛磺酸保护组在伤后6h、12h和24h心肌细胞凋亡指数、Fas蛋白表达和Caspase-3活性较烧伤组均有不同程度降低(P＜0.05)。烧伤组心肌细胞凋亡指数与Fas表达之间有良好的相关性(r=0.86，P＜0.05)。结论牛磺酸对Fas系统介导烧伤后大鼠心肌细胞凋亡有较好的抑制作用。【关键词】牛磺酸；Fas系统；细胞凋亡；心肌；烧伤EffectsoftaurineonFasantigeninvolvementin

3、apoptosisofcardiomyocytesinearlypostburnstageolecularBiologyofJiangxiMedicalCollege，Nanchang330006，China【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheeffectsoftaurineontheapoptosisandexpressionchangeofFasantigenincardiomyocytesduringtheearlypostburnstage.MethodsHealthyadultC10μg(1μg/μl)，37℃水浴60min，于激发波长385

4、nm，发射波长465nm，测其荧光强度变化，其活性单位用DEVD-AMCnmol/(h·mg)蛋白表示。1.6统计学处理所有实验数据均以x±s表示，采用SPSS11.0软件处理分析，两组间比较采用Student’st检验，多组间比较采用方差分析。2结果2.1烧伤后心肌细胞凋亡数目变化与假烫伤组(Sham)比较，烧伤组大鼠在伤后6～24h的不同时相点的心肌细胞凋亡指数均有显著性增加(P＜0.01)，在伤后12h，心肌细胞凋亡指数达峰值；烧伤加牛磺酸组心肌细胞凋亡指数显著性地低于烧伤组(P＜0.05)，表明牛磺酸对烧伤后心肌细胞凋亡有较好的拮抗作用(表1)。表1心肌细胞凋亡指数、FasmR

5、NA表达及Caspase-3活性(x±s)注：与对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与烧伤组比较，ΔP＜0.052.2心肌组织Fas基因mRNA表达心肌组织Fas基因mRNA经RT-PCR和电泳检测，经密度扫描仪测得Fas条带(436bp)与C-actin条带(389bp)峰面积积分，以Fas/actin比值表示Fas基因mRNA表达水平，结果显示，烧伤后3h心肌Fas基因mRNA表达即呈显著性升高，于伤后12h达峰值，伤后24hFas基因mRNA表达仍显著性高于假烫伤组。与烧伤组比较，在烧伤后3h，6h，12h及24h，烧伤加牛磺酸组心肌FasmRNA的表达均有显著性下降(P

6、＜0.05)，表明牛磺酸对烧伤后心肌Fas基因mRNA表达有一定的抑制作用。2.3心肌组织Fas/FasL、Caspase-8及Caspase-3蛋白表达的变化烧伤组大鼠心肌Fas蛋白表达在伤后3h即显著性高于对照组(P＜0.05)，于伤后12h达峰值，伤后24h仍显著高于对照组；FasL蛋白仅在伤后12h较对照组差异有显著性，Caspase-8蛋白在伤后3h也呈显著性增高，伤后24h仍高于对照组：Caspase-3蛋白表达在伤后6h开始呈显著性升高(见表2)，伤后24h仍高于对照组。与烧伤组比较，烧伤加牛磺酸组心肌细胞中FasCaspase-8及Caspase-3蛋白表达在伤后6h、

7、12h及24h均呈显著性降低(P＜0.05＝。表2心肌组织Fas/FasL、Caspase-8和Caspase-3蛋白表达水平［PEI(%)，x±s］注：与对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与烧伤组比较，ΔP＜0.052.4心肌组织Caspase-3活性变化烧伤组大鼠心肌Caspase-3活性在伤后3h即显著高于对照组(见表1)，伤后12h达峰值，伤后24h仍然高于对照组；烧伤加牛磺酸组心肌细胞中Caspase-3活性在伤后6h、12