浅蓝菌素脂质体的制备及其对肿瘤细胞体外增殖影响的研究

《浅蓝菌素脂质体的制备及其对肿瘤细胞体外增殖影响的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、浅蓝菌素脂质体的制备及其对肿瘤细胞体外增殖影响的研究【摘要】　　目的制备浅蓝菌素脂质体并研究其对HER2/neu(erbB2)原癌基因过表达肿瘤细胞株体外增殖的影响。方法采用超声薄膜分散法制备浅蓝菌素脂质体；正交设计优化处方；HPLC法测定药物包封率及脂质体中药物浓度；离心加速实验及冷藏实验考察脂质体稳定性；活细胞计数法测定细胞生长曲线；MTT法测定游离浅蓝菌素及浅蓝菌素脂质体对细胞的增殖抑制作用。结果浅蓝菌素脂质体的平均粒径为134.3nm，稳定性良好，最佳处方条件下药物包封率为(53.45±3.67)%，脂质体中药物质量浓度为(1.126±0.06

2、5)mg/mL，剂量依赖性抑制SKBr3和SKOv3细胞的增殖，IC50分别为9.62和9.32μmol·L-1。结论该制备工艺和处方可行，所制备的浅蓝菌素脂质体对SKBr3细胞和SKOv3细胞有明显的增殖抑制作用，且作用强于游离浅蓝菌素。【关键词】浅蓝菌素脂质体包封率肿瘤细胞IC50　　Abstract:ObjectiveTooptimizethepreparationofceruleniniposomesandinvestigatetheeffectofceruleninliposomesonproliferationoftumorcells

3、overexpressingHER2/neuinvitro.MethodsCeruleninembeddedinliposomesbeddingrateofceruleninesesentanddeepfreezing.ThegroesatdifferentconcentrationsinedbycountingthecellnumberandIC50ofceruleninliposomesinedbyMTTmethod.ResultsTheaveragediameterofceruleninliposomesbeddingrateofceruleni

4、nintoliposomesesg/mL.TheliposomesinhibitedthegroannerandtheIC50ofceruleninliposomesonSKBr3andSKOv3cellsol/Lrespectively.ConclusionTheceruleninliposomesthatodifiedformulationinhibitedtheproliferationofSKBr3andSKOv3cellsinvitroes;embeddingrate;tumorcells;IC50　　近年来研究发现脂肪酸合成酶(FAS

5、)在多种恶性肿瘤如乳腺癌、卵巢癌中呈高表达，并且与肿瘤的恶性程度及预后相关［1，2］。FAS的抑制剂浅蓝菌素通过与脂肪酸合成酶复合体系的β酮脂酰ACP合酶末端丝氨酸的SH结合，形成内酰胺从而使FAS失活，但只有HER2/neu(erbB2)原癌基因过表达的肿瘤细胞株才对浅蓝菌素敏感［1］。　　　　浅蓝菌素(cerulenin,CE)为浅蓝头孢霉菌的次级代谢产物，研究发现其也可从多种微生物及动物组织中分离提取［3］。除了用于治疗肥胖症外，近几年还发现浅蓝菌素具有抗真菌［4］、抗病毒［5］、抗癌［6］等药理作用，引起了研究者的极大兴趣。但该化合物水

6、溶性差（溶解度约为0.3mg/mL）、毒副作用较强，且化学性质不稳定。研究表明，脂质体作为药物载体可以有效地降低毒副作用，且免疫脂质体可以将药物靶向释放到靶分子［7］。本研究制备了浅蓝菌素脂质体(CEL)，对其稳定性进行考察；并以HER2/neu(erbB2)过表达的肿瘤细胞株SKBr3和SKOv3为实验对象，考察CEL对细胞体外增殖的影响。　　1材料与方法　　1.1仪器与试剂　　SHIMADZULC10ATvp高效液相色谱仪(日本岛津)；C18ODS分析柱(DiamonsilTM,5μm,150mm×4.6mm，北京迪马科技有限公司)；REVC

7、O3000细胞培养箱(美国REVCO公司)；Model312分光光度平板读数计(BiotechResearchLaboratoriesInc.)；RE52旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)；BI90型激光粒度分析仪(BrookhevenCo.,USA)；SIGMA3K18低温高速离心机（德国SIGMA公司）；JY250探头式超声仪(浙江三门超声波仪器厂)。　　　　浅蓝菌素(SigmaInc.,纯度>98％)；胆固醇(上海生物化学试剂公司)；大豆卵磷脂(上海油脂一厂)；MEM培养基(HycloneTM,ThermoFisherScientific

8、Inc.)；胎牛血清(FBS，杭州四季青生物工程材料有限公司)；非必需氨基酸(A