资源描述：
《主动脉弓缩窄程度与心肌肥大的相关性研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、主动脉弓缩窄程度与心肌肥大的相关性研究 近年来,随着基因敲除及转基因技术的兴起及发展,小鼠作为实验动物在心血管疾病的研究中发挥越来越重要的作用.主动脉弓缩窄术(transverseaorticconstriction,TAC)是目前常用的研究压力过负荷型心肌肥大及心力衰竭的模型[1].TAC所致的病理性心肌肥大不是一个静止状态,而是一个进行性发生发展的过程.心脏在受到过度的压力负荷时会发生代偿性心肌肥大(向心性肥大),此时如无有效的干预措施,代偿性心肌肥大会进展为失代偿性心肌肥大(离心性肥大),甚至心力衰竭[2].小鼠TAC后发生心肌肥大的时间及严
2、重程度主要与主动脉弓缩窄程度直接相关.结合国内外的报道,目前TAC时采用的缩窄针主要有26G及27G两种型号[3-4],但是由于小鼠的个体差异以及人为操作的不同,即使采用相同的缩窄针也可能造成不一致的缩窄程度. 因此,建立客观评价小鼠主动脉弓缩窄程度的方法便成为影响整个实验成败的前提及基础.本研究采用超声多普勒检测方法,通过颈右动脉与颈左动脉血流之比来评价TAC的成败及程度,并在术后2周对主动脉弓不同缩窄程度的小鼠进行超声心动图及心脏形态学观察,了解主动脉弓缩窄程度与心肌肥大发生发展的相关性,为TAC在心血管疾病研究中的应用奠定基础. 1材料和方
3、法 1.1材料 1.1.1实验动物及分组 6~8周清洁级雄性C57BL/6小鼠60只,体重22~25g,由北京大学医学部提供[生产许可证号SCXK(京)2011-0012].于12h明暗交替,室温18~23℃动物房饲养.小鼠随机分为3组,分别为假手术组(sham)、26G缩窄针主动脉弓缩窄组(TAC26G组)27G缩窄针主动脉弓缩窄组(TAC27G组),每组20只. 1.1.2主要仪器 ALC-V8S型小动物呼吸机(上海奥尔科特生物技术有限公司),ALC-HTP型动物恒温系统(上海奥尔科特生物技术有限公司),LG-PS2鹅颈冷光源(Olym
4、pus公司,日本),显微手术器械(上海医疗器械有限公司),AE-100电子分析天平(Mettler公司,瑞士),VEVO2100超声仪(VisualSonics公司,加拿大). 1.2方法 1.2.1主动脉弓缩窄小鼠模型建立. 按照已有文献报道进行模型建立[5-6],采用氯胺酮(80mg/kg)与甲苯噻嗪(15mg/kg)混合,腹腔注射麻醉,小鼠麻醉后仰卧位固定于恒温垫上,经气管插管与小动物呼吸机连接(潮气量0.5ml/次,呼吸频率105~110次/min).于胸骨前正中打开胸腔,暴露主动脉弓部,在左颈总动脉与头臂干之间穿一5-0号丝线,并紧贴
5、血管上置一26G或27G缩窄针,用丝线将动脉与针头一起扎紧并迅速抽出针头,按照统一标准造成不完全缩窄,常规关胸,缝皮.手术切口处用碘伏涂覆,待小鼠自主呼吸恢复后脱机.假手术组除不做缩窄外,其余操作均与主动脉弓缩窄组相同. 1.2.2超声多普勒检测小鼠颈总动脉流速 应用VEVO2100超声仪及40MHz高频探头对小鼠进行超声多普勒检测,获取血液流速的二维及彩色图像.根据右侧颈动脉流速与左侧颈动脉流速之比来判断小鼠TAC的成败及手术的一致性.颈右动脉/颈右动脉(RCA/LCA)为5~7者入TAC26G组,RCA/LCA为8~10者入TAC27G组.
6、 1.2.3超声心动图检测小鼠心脏结构及功能 应用VEVO2100超声仪及40MHz高频探头于术后2周对小鼠进行超声心动图检测,获得M型超声心动图图像,检测舒张期室间隔厚度(IVSd);舒张期左心室后壁厚度(LVPcMullenJR,SchinkeM,etal.Mousecar-diacsurgery:prehensivetechniquesforthegenerationofmousemodelsofhumandiseasesandtheirapplicationforgenomicstudies[J].PhysiolGenomics,2004,
7、16(3):349-360 [2]Diechanismsandnoveltherapeutictargets[J].Physiology(Bethesda),2007,22(1):56-64 [3]李晓梅,马依彤,杨毅宁,等.小鼠主动脉弓缩窄模型的建立及评价[J].中国比较医学杂志,2008,18(11);24-29 [4]ZelarayanL,RengerA,NoackC,etal.NF-kappaBacti-vationisrequiredforadaptivecardiachypertrophy[J].CardiovascRes,2009
8、,84(3):416-424[5]ChintalgattuV,AiD,LangleyRR,etal.Card
