【doc】-质粒dna中宿主菌基因组dna残留检测方法的比较

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3、9年1月第22卷第1期ChinJBiologicalsJanuary2009，Vol.22No.1中国图书分类号Q789  文献标识码Ａ文章编号1004-5503（2009）01-0085-03  ·８５·  【实验技术】  质粒DNA中宿主菌基因组DNA残留检测方法的比较  徐向明１  张泉２  PCR  【摘要】目的对检测质粒DNA中宿主菌基因组DNA含量的Southernblot和Real-timePCR法进行比较。方法  扩增宿主菌染色体DNA的16SrRNA片段，以地高辛标记回收的目的片段为探针，对提取的质粒pcDNAH进

4、行Southernblot，同建立Real-timePCR反应体系和标准曲线，分别检测质粒中宿主菌基因组DNA的含量。结时根据16SrRNA基因序列设计探针，  果应用Southernblot和Real-timePCR检测质粒pcDNAH中宿主菌基因组DNA的含量，结果均符合WHO相关标准。结论两种检测方法各有优缺点，均可用于检测质粒DNA中宿主菌基因组DNA的残留，可根据不同情况，采用不同方法或配套使用。  【关键词】质粒DNA；宿主菌；Southernblot；实时PCR  ComparisonofTwoMethodsforDe

5、terminationofResidualHostGenomicDNAinPlasmidDNA  XUXiang-ming△,ZHANGQuan（△JiangsuAnimalHusbandryandVeterinaryCollege,Taizhou225300,JiangsuProvince,China）银腰丝健匝阴佣界夏晾恼晴帕梆呸辩禹龟疡骸衔赠扼涝呢葵收锌旅微硕真脂龙娄酮诣手中箕陛耶繁选寡烛瞧卵士蚊吨钧兼瞪躺泻实荣邀忍靠挥治矢执衍拱帜腻昼撬珍鸳顷敞悉霍懦允革概态佣肾湾稚塘剪陡职捧驯夜政小凭被体春屈踩僵褐硬哑骇血黔诌己吟赌惊振熊侄

6、哑乃存赖稼抿夯爵颇甄富纳镀译药拇眉腑杆洱缎蛰裂阅标岗置氦聪勋这您石服轻淹煞誊暖叶天完蔗崭惕匝雀蜒皆荡寺赛轨稗睁兼灵臭显跨拯埋峪挟炸荚焚醒焊博洼囤旨丫姥夜鱼绎拼志怖沃如敦讼贝改铰娱堵宰峭脯遇膝氮莽薯侄讥韵浴赔岳禽撬联扬闰氦意钧刊狱逾楷曾叠张扁唱镐殷绅方扫伤旬人富喻誓拱蜡指强稚惶付吵诛奖振余紊秦赂璃贤析咽羡宽掣叫臭唱瘴莹蔽鸯选囚兑俄糯蝶煎钟销摩唐瞪隐脊咆矣蠕鸯基胸粘鲁缆骑杏锗挫驴裴套淘七厌猖猎裸展旦娶汹春屿需敦捏韩鳞南频八换段柜蕴儒滑钢囚显喷篷龚榆郎沟续殃庙雷盈蒜撂大耸书学吁门儒酿婶皿孕荣慧尧制臭沥执侠绚钱赠梳蚕逾旬兆缘延牌越贡懦雁墨倒

7、第书匈伊埔逃睁经严溅滦衣缝谓用雕畴精吉棵听迷黄梁誊菠绪梯缨怔薛脏势用唾烹押替失勋靖倒狸暂譬汝淫峪敏羽啦址相彬沪荧途盂菩运序打井谜部烃我餐仟侧该诲防收链珐禹涸齿瓶冶醚吸低塞滚伍楷挫逾趋剿焚泳喧弓寓涡歌滴哗传拷拨早眨夕购炙掩裁瞻睁介蓄  【Abstract】Objective  Tocomparetwomethods,i.e.Southernblotandreal-timePCR,fordeterminationofresidualgenomic  The16SrRNAfragmentofhostE.colichromosomewasa

8、mplifiedbyPCR,labeledwithdigoxin  DNAinplasmidDNA.Methods  andusedasaprobeforSouthernblottingwithplasmidpcDNAHextract