上皮性卵巢癌患者set8基因3'非翻译区rs16917496位点单核苷酸多态性观察

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1、上皮性卵巢癌患者SET8基因3’非翻译区rsl6917496位点单核苷酸多态性观察史淑红河北医科大学第二医院目的观察上皮性卵巢癌患者SET8基因3’非翻译区rsl6917496位点单核苷酸多态性变化，并探讨其与患者预后的关系。方法选取100例上皮性卵巢癌患者为病例组，100例健康体检者为对照组，检测并比较两组受检者SET8基因3’非翻译区rsl6917496位点单核苻酸多态性。将病例组患者按基因型分组，对各亚组进行生存分析，比较各组3年生存率。结果病例组基因型CC型5例、CT型52例、TT型43例，等位基因C频率31

2、%、T频率69%o对照组基因型CC型13例、CT型38例、TT型49例，等位基因C频率32%、T频率68%。两组CC、CT基因型构成比相比，P均<0.05;TT基因型构成比相比，卩〉0.05;两组中八C等位基因频率无统计学差异(x2=0.046,P=0.830)。病例组SET8基因3’非翻译区rsl6917496位点基因型为CC、CT、TT患者3年生存率分别为80%(4/5)、74.1%(40/54)、58.5%(24/41),三种基因型患者3年生存率相比,P>0.05。结论上皮性卵巢癌患者SET8基因3’非翻译区r

3、sl6917496位点基因型CC构成比低于正常女性。SET8基因3’非翻译区rsl6917496位点基因型为CC、CT、TT的上皮性卵巢癌患者3年生存率相近。关键词：SET8基因；单核苷酸多态性;卵巢肿瘤;上皮性卵巢癌;SET8基因3’非翻译区(3’UTR)的miR-502结合区域内存在i、sl6917496位点单核苷酸多态性(SNP),以往研究发现该位点单核苷酸多态性与肺癌［3］、白血病［4,5］、肝癌［6］、乳腺癌等多种肿瘤的发生、发展相关，但是其与上皮性卵巢癌发生及预后的关系尚不明确。本研究观察了上皮性卵巢癌患

4、者SET8基因3’非翻译区rsl6917496位点SNP，并探讨其与预后的关系。现报告如下。1资料与方法1.1临床资料选取2008年1月~2012年12月收治的100例上皮性卵巢癌患者为病例组，患者年龄12~76岁。均经术后病理检查证实为上皮性卵巢癌，临床分期I期18例、II期24例、III期50例、IV期8例。患者术前均未接受任何治疗。另选同期体检且年龄匹配的健康女性100例为对照组。本研宄已获我院咲学伦理委员会批准，患者均己签署知情同意书。1.2SET8基因3’UTRrsl6917496位点SNP观察病例组患者术

5、前、对照组患者体检时抽取外周血3mL,按照DNA提取试剂盒说明书操作提取基因组DNA，用分光光度计测算DNA的浓度及纯度，取A26QnE/A28QnE为1.8~2.0的样品用于后续实验。登陆NCBI数据库(.ncbi.nlm.nih.gov.vlib.muc.edu.snp/)查找SET8基因3’UTRrsl6917496位点的核苷酸序列，设计PCR扩增引物。上游引物为:5’-CCTGGTCAGTGGTCAGCAAAT-3’，下游引物为:5’-CTGGGAAACACGCTCAAAATC-3’。根据预实验确定PCR最佳

6、反应条件及反应体系，反应体系：DreamTaqGreenMasterMix12.5uL,上游引物(10umol/L)1uL,下游引物(10ymol/L)1uL,DNA模板2uL,无核酸水8.5uL。反应条件:94°C、3min,94°C、30s,60°C、30s,72°C、40s,72°C>3min。共38个循环。取5uLPCR产物经琼脂糖凝胶电泳，观察有无淸晰条带，如有清晰条带则可说明样品成功扩增，若无清晰条带则更改PCR条件重新扩增。将扩增成功的PCR产物及上下游引物一起送往上海生工生物工程技术有限公司进行测序，

7、得到每例受检者的基因型。1.3随访方法病例组患者术后均采用电话随访3年，无失访者。1.4统计学方法采用SPSS21.0统计软件。病例组和对照组基因型和等位基因频率比较采用X检验和Fisher确切概率法。将病例组患者按基因型分为CC、CT、TT组，釆用Kaplan-Meier法进行生存分析，并计算SRT8基因3’非翻译区rsl6917496位点不同基因型患者3年生存率。P〈0.05为差异有统计学意义。2结果病例组基因型CC型5例、CT型52例、TT型43例，等位基因C频率31%、T频率69%。对照组基因型CC型13例、

8、CT型38例、TT型49例，等位基因C频率32%、T频率68%。两组CC、CT基因型构成比相比，P均<0.05;TT基因型构成比相比，卩〉0.05;两组丁、C等位基因频率相比，P>0.05o随访3年，病例组32例患者死亡。病例组CC、CT、TT基因型患者3年生存率分别为80%(4/5)、74.1%(40/54)、58.5%(24/41),各基因