set8基因3'端非翻译区的mir-502结合位点单核苷酸多态性与食管癌患者临床特征及预后的关系

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1、大学所有。否则，承担相应的法律责任。。√鼍丢繁：：：。1二¨j’。’．．≮研究生签名：球导师签谢二级学院签章，：'加，雩年弓月哆日河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：赵乐导师签章：／>加f多年≥月巧日目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯OOQOO⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4研究论文SET8基因3’

2、端非翻译区的miR-502结合位点单核苷酸多态性与食管癌患者临床特征及预后的关系前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8一日lJ吾⋯“⋯一”⋯”一⋯⋯“⋯⋯⋯⋯⋯”⋯””⋯”⋯一””一“”⋯一一”‘材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9结果⋯⋯⋯⋯⋯···⋯⋯⋯···⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯l7附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯20讨论⋯⋯⋯··⋯·⋯⋯⋯·⋯⋯“⋯⋯·⋯⋯⋯·⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯···25结论⋯⋯⋯⋯

3、⋯···⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3l综述MicroRNA与食管癌关系的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯35致谢⋯“⋯··⋯“⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯一．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯··48个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯·49中文摘要SET8基因3’端非翻译区的miR-502结合位点单核苷酸多态性与食管癌患者临床特征及预后的关系摘要目的：MicroRNA(miRNA)是一类高度保守的的小型非编码RNA，主要通过与靶mRNA的3’端非翻译区(3’U

4、Ⅱ己)完全或不完全配对，降解靶mRNA或抑制其翻译，对靶基因的表达水平进行调控。目前已知miRNA有1000多种，染色体1／3以上的基因都受其调控，IIliRNA调节细胞增殖、分化、凋亡、激素分泌、肿瘤发生与发展等重要生物活动。单核苷酸多态性(SNP)是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异引发的DNA的多态性变化，在整个人类基因组中广泛分布，并决定着群体和个体基因序列的细微差别。miRNA在靶基因上的结合位点存在有功能的SNP，由于单个碱基的变异，影响miRNA和靶mRNA特异性结合，从而影响靶基因的表达。已有多项研究表明，miRNA结合位点SN

5、P与多种肿瘤发生密切相关，但关于miRNA结合位点单核苷酸多态性与食管癌的研究甚少。rsl6917496是存在于SET8基因YUTR区域的miR-502的多态性结合位点，本研究首次进行SET8基因3’端非翻译区miR-502的结合位点SNP与食管癌患者临床特征和预后情况的相关性研究，并分析患者临床特征和预后的关系，为制定合理的治疗方案、对食管癌患者预后评估提供了科学依据。方法：1研究对象及随访：选取2002年7月--2007年9月于河北医科大学第四医院胸外科住院的食管癌手术患者65例，经内镜检查、组织病理确诊为食管癌，并行食管癌根治手术。采集食

6、管癌患者静脉血标本，并准确记录所有患者的性别、年龄、临床分期等临床特征。通过门诊复查、电话、信件随访食管癌患者术后的生存情况，随访截止时间为2012年9月。另选取2011年10月-2012年5月间在河北医科大学第四医院体检的60例正常人，详细记录体检资料，并除外与食管癌相关的疾病，采集静脉血样本。2基因组DNA提取、扩增及测序：用DNA纯化试剂盒提取食管癌组及对照组静脉血标本的基因组DNA，DNA鉴定合格后，采用PCR技中文摘要术扩增目的片段，上游引物为：5'-TCACGACGGTGCTACCTAAG．3’，下游引物为：5’．CATGCTGGT

7、GTGACACAGTC．3’。扩增产物经琼脂糖凝胶电泳证实后进行测序，同一标本采用双向重复测序。3统计分析：采用t检验比较计量资料，采用#检验或Fisher确切概率法比较计数资料。单因素分析采用Kaplan．Meier方法及Log．Rank方法；多因素分析采用COX风险回归模型，并计算尸值、相对危险度(RR)、95％可信区间(CI)。实验数据均采用SPSS17．0统计软件进行统计学分析，P<0．05被认为有统计学意义。结果：l食管癌组65例与对照组60例中T、C等位基因频率无明显差异舒=o．305，P=-0．581)；在食管癌组与对照组之间，以

8、们基因型为对照，分别与C／T、C／C、C／T+C／C基因型进行比较，差异皆无统计学意义pO．05)。即食管癌组与对照组的rsl6917496多态位点S